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xissy

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by linxt2005 at 2012-10-18 17:14:22
看你的用途是什么。
切胶回收的样品活性很难保证,若是用于抗体制备的话,可以考虑。
具体方法为:
1. 电泳,根据需要选择可以上样孔的容量。
2. 电泳后,用 1M KCl 溶液染色,条带须仔细分辨,淡白色。
3. 切 ...

请问楼主,我回收胶条,就是为了制备抗体用的。但是我有几个疑惑,想请教一下:
1.PBS研磨,放置过夜,离心,就可以从上清中得到蛋白吗?因为之前看到的是PBS研磨,反复-80℃冻融,再离心之类的。
2.也看到其他地方说,PBS研磨成匀浆,加完全弗氏佐剂就可以免疫了。这样看来就不需要离心了,回收蛋白量也自然很高。
11楼2015-02-01 10:14:59
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简单HE认真

木虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by xissy at 2015-02-01 10:14:59
请问楼主,我回收胶条,就是为了制备抗体用的。但是我有几个疑惑,想请教一下:
1.PBS研磨,放置过夜,离心,就可以从上清中得到蛋白吗?因为之前看到的是PBS研磨,反复-80℃冻融,再离心之类的。
2.也看到其他地 ...

可以直接研磨胶条免疫的,我们之前公司有做过,效果有的,可以试试看
简单做人,认真做事。
12楼2015-02-02 15:57:27
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lcp_2014

新虫 (初入文坛)

我的蛋白也是包涵体 不知道怎么纯化 不知道楼主做的是不是膜蛋白
13楼2015-10-24 11:36:58
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