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xuelin1987

铜虫 (小有名气)

[求助] 410nm处邻苯二酚的摩尔吸光系数是多少?

我在测多酚氧化酶,以邻苯二酚为底物,0.05mol/L磷酸缓冲液(pH=5.7)为反应介质,在410nm处测多酚氧化酶1分钟内的OD值变化,现在我想计算多酚氧化酶的酶活,需要410nm处邻苯二酚的摩尔吸光系数,请问有谁有,急需!谢谢!
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循序渐进,不懂就问
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sssuhua

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

不是用3min钟内的420nm波长下吸光值的变化来衡量酶活性的大小吗?我是这样测定的

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2013-01-08 17:41:22
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liujialiang

金虫 (小有名气)

。。。同样想知道,怎么看不到
3楼2012-12-02 10:14:12
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xuelin1987

铜虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by sssuhua at 2013-01-08 17:41:22
不是用3min钟内的420nm波长下吸光值的变化来衡量酶活性的大小吗?我是这样测定的

你好!谢谢你的回答,可不可以给我指导一下具体的方法啊或者你参考的文献和书籍,因为我刚开始接触测这个指标,不是太明白,谢谢!
循序渐进,不懂就问
5楼2013-01-09 20:45:10
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810087080

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

多酚氧化酶PPO活性测定
一、实验原理
PPO催化各种酚与O2氧化为醌。本实验是采用邻苯二酚为底物,在0.2M磷酸氢二钠—0.1M柠檬酸缓冲液pH5.8的反应体系中,PPO催化邻苯二酚形成褐色的醌,在分光光度计410nm处使反应体系的OD值产生变化,通过OD值上升的读数变化确定PPO的酶活大小。
二、实验材料与试剂
1试剂:
0.01M邻苯二酚溶液、0.2M磷酸氢二钠—0.1M柠檬酸缓冲液pH5.8
三、操作步骤
在含有4ml pH5.8的0.2M磷酸氢二钠—0.1M柠檬酸缓冲液试管中加入0.05ml、浓度为0.05M的邻苯二酚溶液,在30℃恒温水浴中预热后加入0.05ml酶液,反应5min,在分光光度计410nm处读取吸光值。
三分天注定,七分靠打拼,爱拼才会赢
6楼2013-01-09 22:49:51
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