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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » LB扩大培养老长出颗粒状，急急急~~~！
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fanny9900108

金虫 (小有名气)

[求助] LB扩大培养老长出颗粒状，急急急~~~！

本人做PCR突变，跑胶正常条带也对，转化到XL10之后，在LB固体培养基上能长出单菌落，但是将单菌落挑入到含AMP的LB培养基中长出来的有颗粒状，LB澄清，有时候有颗粒状，也会混，求高手指点付图如下：

2012-10-16 09.12.33.jpg



2012-10-16 09.13.30.jpg



2012-10-16 09.13.56.jpg
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stayhungry,stayfoolish
1楼 2012-10-18 09:08:17
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by fanny9900108 at 2012-10-18 10:59:04
我用小管试过了，长出来一粒一粒的少了，但是有絮状沉淀，LB也没有特别混~~...

感觉是你的氨苄有问题。你氨苄的浓度多少？到平板的时候有没有等培养基冷却到50°C一下？建议重新配置抗生素STOCK，做平板，挑单菌落划线后再接液体。
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4楼2012-10-18 11:54:09
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
挑单菌落先在试管中小量培养过夜，然后再按照1:-50-100扩大培养。
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2楼2012-10-18 09:26:25
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fanny9900108

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-18 09:26:25
挑单菌落先在试管中小量培养过夜，然后再按照1:-50-100扩大培养。

我用小管试过了，长出来一粒一粒的少了，但是有絮状沉淀，LB也没有特别混~~
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stayhungry,stayfoolish
3楼2012-10-18 10:59:04
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fanny9900108

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-18 11:54:09
感觉是你的氨苄有问题。你氨苄的浓度多少？到平板的时候有没有等培养基冷却到50°C一下？建议重新配置抗生素STOCK，做平板，挑单菌落划线后再接液体。...

氨苄的浓度时100ng/ML,新配的，别人也用了我到的板子，能长得正常，如果不冷却到50度，会怎么样？我这可不可能是杂菌啊？能不能从图片上看出有什么问题么
？
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stayhungry,stayfoolish
5楼2012-10-18 12:37:01
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