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玉婷881213

新虫 (小有名气)

[交流] 【交流】多糖水提醇沉 70%乙醇沉24h 室温 沉淀量不多 效果不好 已有13人参与

多糖水提醇沉 70%乙醇沉24h 室温 沉淀量不多 效果不好,怎么才能让沉淀量多些。
现在醇沉之后的沉淀过滤,我还想把上清旋蒸,缩小体积,在来一次醇沉,各位大侠,看看行吗?
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tongliwoai

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
玉婷881213: 回帖置顶 2012-10-17 13:16:00
个人认为4楼和8楼的虫友说的比较有道理。
首先,多糖的量确实和你的药材中本来的含糖量是关系的。沉淀多糖时往往是将加入乙醇的提取液置于4℃的冰箱里面,这样效果比较好。
第二,不建议用95的乙醇进行醇沉。95乙醇可以把一些脂溶性的物质也沉淀出来,这样得到的多糖含量就比较低了。
第三,个人的经验,用80的乙醇沉淀下来的多糖要比70的多一些。我一般都是取出上清液,沉淀多次,直至无沉淀析出为止。
另外,有些做法是先用sevage法除去一些蛋白后在沉淀多糖,这样多糖中的杂质也会少一些。木虫上关于制备多糖沉淀蛋白的方法有很多讨论,楼主可以搜索一下,个人认为还是很有帮助的。
春有百花秋有月,夏有凉风冬有雪,若无闲事挂心头,便是人间好时节
10楼2012-10-17 13:08:12
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632295417

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
karl2100: 金币+1, 谢谢回复! 2012-10-16 23:12:51
建议你用大浓度的乙醇醇沉,95的乙醇吧,条件允许的话,可以醇沉两次。上清就别醇沉了吧,里面的多糖应该不多
坚强勇敢的活着
2楼2012-10-16 13:28:51
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普通回帖

szq215216

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
加大醇沉浓度,使含醇量超过75%,甚至80%,试试看
3楼2012-10-16 17:39:03
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xnnd2008

金虫 (正式写手)

降低温度试试
4楼2012-10-16 17:48:37
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玉婷881213

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 632295417 at 2012-10-16 13:28:51
建议你用大浓度的乙醇醇沉,95的乙醇吧,条件允许的话,可以醇沉两次。上清就别醇沉了吧,里面的多糖应该不多

两次醇沉明白了。操作是第一次的沉淀和上清给他摇匀了,在加乙醇,再沉一次,还是?怎么操作。。。
5楼2012-10-16 20:02:57
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908133756

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
用浓度高的乙醇试试,95%乙醇。
6楼2012-10-16 21:07:25
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632295417

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 玉婷881213 at 2012-10-16 20:02:57
两次醇沉明白了。操作是第一次的沉淀和上清给他摇匀了,在加乙醇,再沉一次,还是?怎么操作。。。...

第一次醇沉之后,离心或者过滤弃去上清醇溶液,得到的算是浸膏吧,然后再醇沉。
坚强勇敢的活着
7楼2012-10-16 22:35:19
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蓝龙教主

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
首先看看这个材料里面多糖多不多,要是不多的话,可以浓缩到足够大的浓度,然后再加大量乙醇,加到80%左右浓度后醇沉。
上清液,浓缩后不要混起来,单独保留吧,一般是小分子的糖在里面。
我做的东西里面,采用50%醇沉都能得到很多糖,所以你要看看是不是本身里面糖就不多。
8楼2012-10-16 23:38:45
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hu_fox

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以把上清液浓缩,然后再醇沉,但是建议用95或者无水乙醇,效果比较好。有时候多糖量大的时候,一次沉淀的确没办法沉淀出所有多糖,是会将清液浓缩后再次醇沉的。
9楼2012-10-17 11:21:56
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