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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【交流】多糖水提醇沉 70%乙醇沉24h 室温 沉淀量不多 效果不好
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玉婷881213

新虫 (小有名气)
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10楼: Originally posted by tongliwoai at 2012-10-17 13:08:12
个人认为4楼和8楼的虫友说的比较有道理。
首先，多糖的量确实和你的药材中本来的含糖量是关系的。沉淀多糖时往往是将加入乙醇的提取液置于4℃的冰箱里面，这样效果比较好。
第二，不建议用95的乙醇进行醇沉。95乙 ...

再请教点其他的，我的中药经乙醚脱脂脱色后95醇回流取残渣，经水回流后去上清，上清经醇沉得粗多糖，我纠结了好久，要不要SEVAGE法除蛋白？如果不除蛋白的话，我就直接冻干了。。。。
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11楼2012-10-17 13:19:24
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tongliwoai

铁杆木虫 (著名写手)
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11楼: Originally posted by 玉婷881213 at 2012-10-17 13:19:24
再请教点其他的，我的中药经乙醚脱脂脱色后95醇回流取残渣，经水回流后去上清，上清经醇沉得粗多糖，我纠结了好久，要不要SEVAGE法除蛋白？如果不除蛋白的话，我就直接冻干了。。。。...

从楼主的处理过程看来，多糖中是含有蛋白质的。
如果对样品要求不高含一些蛋白貌似影响也不大，有个做多糖口服液的学弟我问过他的多糖制备过程，他们是没有除过蛋白的。但是后来得到的多糖确实是含量不怎么高。
要不要除蛋白，还是看你对样品的需求。
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春有百花秋有月，夏有凉风冬有雪，若无闲事挂心头，便是人间好时节
12楼2012-10-17 13:59:01
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binzy

木虫 (著名写手)
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可以逐渐滴加无水乙醇，增大其浓度，只要你检测合格，浓度大点也没所谓，产率上去了；还有可以通过降温结晶方法，一般十度到十五度就ok了，不过要慢慢从室温过度到低温，否则杂质包裹就不好啦
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穿别人的鞋，走自己的路，让别人找鞋去吧
13楼2012-10-17 16:36:05
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LGYAugust

金虫 (初入文坛)

August
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麻烦请教，醇沉的收率有多高？
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坚持
14楼2012-10-27 14:18:21
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玉婷881213

新虫 (小有名气)
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14楼: Originally posted by LGYAugust at 2012-10-27 14:18:21
麻烦请教，醇沉的收率有多高？

这个没计算过，因为我前期是提多糖，后期要合成，所以只要后期计算合成后的含量就行。但是我做的实验，醇的浓度越好，醇沉的效果越好，之后再把上清液也浓缩，再醇沉的。
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15楼2012-10-30 09:06:38
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LGYAugust

金虫 (初入文坛)

August
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请教高手，我是做中成药生产的，中药材水提醇沉后的浸膏，做微生物超标，怎么办！后续浸膏还要配成口服液，微生物也超标，求救？？？？
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坚持
16楼2012-10-30 18:54:32
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秋雨夜含

铜虫 (小有名气)
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2楼: Originally posted by 632295417 at 2012-10-16 13:28:51
建议你用大浓度的乙醇醇沉，95的乙醇吧，条件允许的话，可以醇沉两次。上清就别醇沉了吧，里面的多糖应该不多

请问如何用95%的乙醇醇沉两次？是第一次得到沉淀后，然后上清液再醇沉么
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做最诚实的实验
17楼2013-06-03 18:51:29
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秋雨夜含

铜虫 (小有名气)
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7楼: Originally posted by 632295417 at 2012-10-16 22:35:19
第一次醇沉之后，离心或者过滤弃去上清醇溶液，得到的算是浸膏吧，然后再醇沉。...

可是再醇沉那体积就不固定了啊，就不能保证醇沉的量啊
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做最诚实的实验
18楼2013-06-03 18:52:29
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杨慧娇

铜虫 (初入文坛)
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我做的是先用95%醇沉，再用85%醇沉，这样可以省点乙醇哈哈。第一次醇沉加乙醇之后离心，弃去上清液，计算沉淀量，然后再按沉淀的质量加入相应倍份的乙醇再离心就可以了。
然后沉淀量和你用乙醇的体积也有很大的关系。一般三倍比较好，还有我觉得之前旋蒸一下更方便操作。
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19楼2013-06-08 18:33:40
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莨叶1991

新虫 (初入文坛)
★
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一般都是用95%的乙醇醇沉的吧，你的药材多糖含量应该不太多 二次醇沉应该效果不大吧
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20楼2013-09-30 10:05:21
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