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duanyongzhong

银虫 (正式写手)

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王之御魂: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-10-16 14:05:35
正值和负值与你设定的参照标准有关,出现负值不要怕,不能说出现负值就是错误的,要分析情况原因。你所测得的结果出现负值是由于你把(灭活后的酶液+底物淀粉+缓冲液)1ml+0.5ml稀盐酸+5ml稀碘液做空白,而实际上实验组的吸光值小于空白组的吸光值,机器的读数就是负值了。你一直认为实验组的吸光值一定是大于空白组的,实际上是搞反了,实验组的吸光值小于空白组才是对的,由于实验组中发酵液中有淀粉酶的酶活,使底物中的淀粉含量降低了,与碘的显色作用就变弱了,吸光值当然就降低了,实验组的吸光值读数小于空白组。你如果把实验组设定读数为零,那么空白组的读数就是正值了,但这两者的差值是相同的,所以设定那个为空白组哪个为实验组对结果没有影响,关键是要把组里的组份物质加对。测定发酵液的淀粉本底吸光值用发酵液+水(补充到试验体积)+碘来测定。
11楼2012-10-15 17:03:47
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王之御魂

木虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by duanyongzhong at 2012-10-15 17:03:47
正值和负值与你设定的参照标准有关,出现负值不要怕,不能说出现负值就是错误的,要分析情况原因。你所测得的结果出现负值是由于你把(灭活后的酶液+底物淀粉+缓冲液)1ml+0.5ml稀盐酸+5ml稀碘液做空白,而实际上实 ...

其实我不用测发酵液的淀粉本底吸光值,我的最终目的只要测得真实的发酵液里α-淀粉酶活就可以。

既然差值不变,那我把这个差值带入上面我作的标准曲线,求得的是5min内淀粉酶消耗的底物淀粉浓度吗?进而可以求得1ml发酵液里α-淀粉酶活吗?
12楼2012-10-15 20:19:24
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duanyongzhong

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
12楼: Originally posted by 王之御魂 at 2012-10-15 20:19:24
其实我不用测发酵液的淀粉本底吸光值,我的最终目的只要测得真实的发酵液里α-淀粉酶活就可以。

既然差值不变,那我把这个差值带入上面我作的标准曲线,求得的是5min内淀粉酶消耗的底物淀粉浓度吗?进而可以求得 ...

这样可以求得淀粉酶的酶活,但要先定义酶活的单位。
13楼2012-10-15 23:03:02
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