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duanyongzhong

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王之御魂: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-10-16 14:05:35

正值和负值与你设定的参照标准有关，出现负值不要怕，不能说出现负值就是错误的，要分析情况原因。你所测得的结果出现负值是由于你把（灭活后的酶液+底物淀粉+缓冲液）1ml+0.5ml稀盐酸+5ml稀碘液做空白，而实际上实验组的吸光值小于空白组的吸光值，机器的读数就是负值了。你一直认为实验组的吸光值一定是大于空白组的，实际上是搞反了，实验组的吸光值小于空白组才是对的，由于实验组中发酵液中有淀粉酶的酶活，使底物中的淀粉含量降低了，与碘的显色作用就变弱了，吸光值当然就降低了，实验组的吸光值读数小于空白组。你如果把实验组设定读数为零，那么空白组的读数就是正值了，但这两者的差值是相同的，所以设定那个为空白组哪个为实验组对结果没有影响，关键是要把组里的组份物质加对。测定发酵液的淀粉本底吸光值用发酵液+水（补充到试验体积）+碘来测定。

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11楼2012-10-15 17:03:47

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王之御魂

木虫 (小有名气)

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引用回帖:

11楼: Originally posted by duanyongzhong at 2012-10-15 17:03:47
正值和负值与你设定的参照标准有关，出现负值不要怕，不能说出现负值就是错误的，要分析情况原因。你所测得的结果出现负值是由于你把（灭活后的酶液+底物淀粉+缓冲液）1ml+0.5ml稀盐酸+5ml稀碘液做空白，而实际上实 ...

其实我不用测发酵液的淀粉本底吸光值，我的最终目的只要测得真实的发酵液里α-淀粉酶活就可以。

既然差值不变，那我把这个差值带入上面我作的标准曲线，求得的是5min内淀粉酶消耗的底物淀粉浓度吗？进而可以求得1ml发酵液里α-淀粉酶活吗？

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12楼2012-10-15 20:19:24

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duanyongzhong

银虫 (正式写手)

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12楼: Originally posted by 王之御魂 at 2012-10-15 20:19:24
其实我不用测发酵液的淀粉本底吸光值，我的最终目的只要测得真实的发酵液里α-淀粉酶活就可以。

既然差值不变，那我把这个差值带入上面我作的标准曲线，求得的是5min内淀粉酶消耗的底物淀粉浓度吗？进而可以求得 ...

这样可以求得淀粉酶的酶活，但要先定义酶活的单位。

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13楼2012-10-15 23:03:02

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