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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 大环内酯类化合物HPLC分不开
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swallow13

禁虫 (正式写手)
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11楼2012-10-18 11:09:46
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peter002

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by syn1985 at 2012-10-18 11:03:58
我们实验室做这么多年的分离都是等度 没人会用梯度 我也想用梯度 可是不会 我曾经没过梯度 效果不如等度的 我觉得应该是我不会弄 你能教教我吗？
如果先用分析型的找方法的话 分析柱子和制备柱子不一样 这样找出来 ...

分离都是使用等度的，分离使用梯度的情况非常少！

一般使用分析型的柱子摸索方法是因为这样可以节约样品，摸索过程中使用分析型的虽然不能完全平移到制备柱，但是90%以上可以的！

个人建议你使用 分析型的摸索方法

PS:最重要的一项，您的样品量不多了哦。节约使用啊
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12楼2012-10-18 12:59:23
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crity328

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by syn1985 at 2012-10-18 10:47:04
是反相柱，填料是BDS型的 是thermo家的柱子 我后来又换了甲醇试过了效果还不如乙腈 后来我又换了一根柱子 还是不行...

这么说的话，检测器应该是PDA吧应该二极管整列检测器吧，你柱子选择是BDS型的应该是碱基峰尾的，应该适合你所检测的物质。那么现在不知道你做出来的效果是怎样的一个情况？是洗脱不出来，还是分不开，还峰型不好，还是什么？
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故天将降大任于斯人也，必先苦其心志，劳其筋骨，饿其体肤，空乏其身，行拂乱其所为，所以动心忍性，曾益其所不能。
13楼2012-10-18 13:58:30
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syn1985

木虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by crity328 at 2012-10-18 13:58:30
这么说的话，检测器应该是PDA吧应该二极管整列检测器吧，你柱子选择是BDS型的应该是碱基峰尾的，应该适合你所检测的物质。那么现在不知道你做出来的效果是怎样的一个情况？是洗脱不出来，还是分不开，还峰型不好， ...

我做的效果就是看着一个样品上去能拿到5-6个峰型很好的化合物 可是里面只有1个是纯的 其他几个都是同一类型 但是从H谱看都是2个类似的化合物
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14楼2012-10-18 14:12:38
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crity328

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
syn1985: 金币+17, ★★★★★最佳答案 2012-10-19 11:25:00
引用回帖:
14楼: Originally posted by syn1985 at 2012-10-18 14:12:38
我做的效果就是看着一个样品上去能拿到5-6个峰型很好的化合物 可是里面只有1个是纯的 其他几个都是同一类型 但是从H谱看都是2个类似的化合物...

这种情况，我估计你的样品还要提纯，如果是同一类型的话因为极性相差比较小，估计很难分离出来。如果单单是检测的话我本来想建议你用缓冲盐试试看，但考虑到后续要制备的话，我怕可能会有影响。
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故天将降大任于斯人也，必先苦其心志，劳其筋骨，饿其体肤，空乏其身，行拂乱其所为，所以动心忍性，曾益其所不能。
15楼2012-10-18 15:10:42
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syn1985

木虫 (正式写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by crity328 at 2012-10-18 15:10:42
这种情况，我估计你的样品还要提纯，如果是同一类型的话因为极性相差比较小，估计很难分离出来。如果单单是检测的话我本来想建议你用缓冲盐试试看，但考虑到后续要制备的话，我怕可能会有影响。...

如果要用缓冲盐后续工作很麻烦 我看文献里面有加二乙胺调ph到8  但是实验室的柱子都不耐碱 化合物又不耐酸 抑郁
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16楼2012-10-19 09:32:26
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crity328

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by syn1985 at 2012-10-19 09:32:26
如果要用缓冲盐后续工作很麻烦 我看文献里面有加二乙胺调ph到8  但是实验室的柱子都不耐碱 化合物又不耐酸 抑郁...

是的，柱子应该能找到1-9pH的，但是用缓冲盐的话对你后续制备有影响的，我也考虑到了，所以没建议你用缓冲盐。
只能再找找其他方法了或者从你的样品纯化想办法。
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故天将降大任于斯人也，必先苦其心志，劳其筋骨，饿其体肤，空乏其身，行拂乱其所为，所以动心忍性，曾益其所不能。
17楼2012-10-19 10:30:27
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syn1985

木虫 (正式写手)
引用回帖:
17楼: Originally posted by crity328 at 2012-10-19 10:30:27
是的，柱子应该能找到1-9pH的，但是用缓冲盐的话对你后续制备有影响的，我也考虑到了，所以没建议你用缓冲盐。
只能再找找其他方法了或者从你的样品纯化想办法。...

谢谢 我再试试其他的条件
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18楼2012-10-19 11:25:23
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