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TloveG

铜虫 (小有名气)

[求助] 银染回收

各位大神帮帮忙啊,聚丙烯酰胺胶银染回收不出来啊,我用了三种方法回收,
1. 加水,不捣碎侵泡过夜
2.加水,捣碎(用研磨棒挤压碎),4度过夜
3.加水,捣碎(用研磨棒挤压碎),然后放入沸水中煮沸10min,缓慢冷却,在放置4度过夜
以上三种方法都回收不出来啊,第一种方法回收PCR没条带,后两种方法回收PCR全弥散,哪位高手给点意见啊,急急急啊
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beishui

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你跑胶之前是怎么处理的呢?
宠辱不惊,看庭前花开花落;去留无意,望天上云卷云舒。
5楼2012-10-11 14:08:00
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beishui

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用PAGE胶袍DNA,是单链DNA,所以跑之前的PCR引物是在一条引物上有磷酸标记的,所以你后面PCR的时候不要有磷酸标记的,另外胶回收是直接在95度水中放置5-10min,之后直接四度离心取上清,拿上清直接去PCR

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宠辱不惊,看庭前花开花落;去留无意,望天上云卷云舒。
3楼2012-10-11 10:18:29
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TloveG

铜虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by beishui at 2012-10-11 10:18:29
用PAGE胶袍DNA,是单链DNA,所以跑之前的PCR引物是在一条引物上有磷酸标记的,所以你后面PCR的时候不要有磷酸标记的,另外胶回收是直接在95度水中放置5-10min,之后直接四度离心取上清,拿上清直接去PCR

可我的是双链DNA啊
4楼2012-10-11 14:00:57
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TloveG

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by beishui at 2012-10-11 14:08:00
你跑胶之前是怎么处理的呢?

PCR产物啊
6楼2012-10-11 15:03:27
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