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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

[求助] 请教一些薄层层析相关的问题,望各位不吝赐教!

1:薄层层析的原理是根据各组分性质不同,从而Rf不同而分离的,主要与哪些性质有关?分子量,极性?如果同样两种二糖,比如蔗糖与纤维二糖,Rf会相同嘛?如果不同,差距大不大?主要是什么造成这些差距的?
2:本人最近表达出一个酶,现在想对酶解出的产物进行薄层层析分析,底物是一个多聚糖(分子式:(C6H7NaO6)x),根据理论最终产物应该为二糖与三糖,实验室没有这种二糖跟三糖的标样,试着用蔗糖与棉籽糖分别作为二糖,三糖对照,请问这样做行不行?
PS:试着做了一次,样品貌似完全跟蔗糖与棉籽糖的Rf不一样……而且样品有些拖尾.
请各位TLC高手传授点知识吧~~
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TORESS

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

question1:主要跟溶剂的极性、物质的极性、及其溶解度有关,还有你的板的情况有关,当然分子量也有一定的关系。Rf只是一个相对值,不能作为一个绝对量来参考,一般谈到Rf时,必须指出所用流动相。如果流动相选的合适,所有物质的Rf都会是不一样的,即使只是R/S不同。所以你选用蔗糖与棉籽糖分别作为二糖,三糖对照是不行的!!!
suggestions:用液相把你的东西分开,分别打质谱、核磁看看才行。
Torres王者归来
2楼2012-10-25 14:49:10
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shuangzi8761

银虫 (著名写手)

楼主 我也在做这个 请教下你做的效果如何呀?
3楼2014-04-18 11:52:05
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东哥虫儿

新虫 (初入文坛)

楼主,你的多糖层析前水解了没?用的是酸吗?要不要中和?

发自小木虫Android客户端
4楼2017-03-06 19:40:08
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