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Marado

金虫 (正式写手)

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[求助] 请教一些薄层层析相关的问题，望各位不吝赐教！

1：薄层层析的原理是根据各组分性质不同，从而Rf不同而分离的，主要与哪些性质有关？分子量，极性？如果同样两种二糖，比如蔗糖与纤维二糖，Rf会相同嘛？如果不同，差距大不大？主要是什么造成这些差距的？
2：本人最近表达出一个酶，现在想对酶解出的产物进行薄层层析分析，底物是一个多聚糖（分子式：(C6H7NaO6）x），根据理论最终产物应该为二糖与三糖，实验室没有这种二糖跟三糖的标样，试着用蔗糖与棉籽糖分别作为二糖，三糖对照，请问这样做行不行？
PS：试着做了一次，样品貌似完全跟蔗糖与棉籽糖的Rf不一样……而且样品有些拖尾.
请各位TLC高手传授点知识吧~~

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1楼 2012-10-08 16:18:15

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TORESS

银虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

question1：主要跟溶剂的极性、物质的极性、及其溶解度有关，还有你的板的情况有关，当然分子量也有一定的关系。Rf只是一个相对值，不能作为一个绝对量来参考，一般谈到Rf时，必须指出所用流动相。如果流动相选的合适，所有物质的Rf都会是不一样的，即使只是R/S不同。所以你选用蔗糖与棉籽糖分别作为二糖，三糖对照是不行的！！！
suggestions：用液相把你的东西分开，分别打质谱、核磁看看才行。