24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

tomichelle1

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 6.8
帖子: 21
在线: 10小时
虫号: 1688229
注册: 2012-03-13
专业: 环境微生物学

[求助] 请教基因敲除！SOS，help

各位同学，请问利用化学法转化后你们的单交换菌落多久能长出来？是否还要在双抗板二次复筛？复筛后是否要做抗性松弛？为什么？松弛培养后是否会造成抗性丢失呢？在蔗糖板利用sacB反选时如何提高阳性率？蔗糖含量是否越高越好？是否需要蔗糖板两次复筛？
我的铜绿假单胞菌单交换后好几天在抗生素平板上不长菌落，后来长出的经蔗糖板反选后还是能在抗生素平板上生长，PCR结果显示都是阴性菌落••••

回复此楼

» 猜你喜欢

上海工程技术大学张培磊教授团队招收博士生已经有3人回复
上海工程技术大学【激光智能制造】课题组招收硕士已经有5人回复
求助院士们，这个如何合成呀已经有4人回复
临港实验室与上科大联培博士招生1名已经有9人回复
想换工作。大多数高校都是评职称时认可5年内在原单位取得的成果吗？已经有7人回复
需要合成515-64-0，50g，能接单的留言已经有4人回复
自荐读博已经有4人回复
写了一篇“相变储能技术在冷库中应用”的论文，论文内容以实验为主，投什么期刊合适？已经有6人回复
带资进组求博导收留已经有10人回复
最近几年招的学生写论文不引自己组发的文章已经有11人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

a grammar question!!!! HELP!!!!!! sos!!!!! 已经有15人回复

1楼 2012-10-07 16:22:53

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

tomichelle1

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 6.8
帖子: 21
在线: 10小时
虫号: 1688229
注册: 2012-03-13
专业: 环境微生物学

送鲜花一朵

引用回帖:

2楼: Originally posted by scelab at 2012-10-07 18:44:31
问题太多，，，

单交换用抗性筛选，一定是多抗。时间长无所谓，从单细胞长成菌落，时间会很长。
蔗糖板sacB反选，有时是不必要的，可以换策略。从抗性角度筛。抗性长的话，就不是目标菌株。多挑几百个试试。
蔗 ...

谢谢帮忙，最近在基因敲除上遇到瓶颈，以后还要多多请教，小女子先谢过了！