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wei_suzhen

新虫 (小有名气)

[求助] 如何克隆一段1200bp的真核基因,序列来自NCBI

想从黑曲霉中提取一种酶的基因,从NCBI已查找到所需基因的序列,但是宿主菌株与我们的不同。因此想通过已查到的基因序列设计引物,来PCR从我们菌株提取的DNA,进而检测我们的菌株是不是也产这种酶。这段基因序列长度是1257bp,含有两个内含子区,而且这段序列内部含有我们所加的酶切位点。通过软件primer primer5设计的引物都不是从两端开始的,现在不知道怎样设计引物来克隆这段序列的全长??
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exon2002

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
设计兼并引物(巢式)做RACE。再麻烦点儿就是做一个cDNA文库,该基因钓出。
6楼2012-10-08 07:09:47
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