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boylover123

金虫 (初入文坛)

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[交流] 关于Transwell迁移实验的一些问题

最近在做Transwell迁移实验，但一直不是很成功，下面有几个问题想跟大家探讨一下，还请各位虫友不吝赐教。
1、上层小室加的细胞悬液为什么要含0.5%的BSA，BSA的作用是什么。
2、下层我用的是含5%FBS的培养基，曾经用过0.4%FBS的培养基，细胞没迁移过去，下层小室FBS是不是含量越低越好。
3、还有就是transwell小室实验前需不需要怎么处理一下，比如用无血清培养基浸润半个小时什么的。
4、加完细胞悬液后一般多长时间染色观察，我看文献有说5h，但是我觉得5h根本都迁移不过去。

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1楼 2012-09-29 11:04:52

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ourlady

新虫 (初入文坛)

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虫号: 2107014

★
boylover123(金币+1): 谢谢参与

1、0.5%的BSA属于细胞保护液，多用于流式细胞分析等试验。配方是1*PBS溶解BSA，质量/体积比为0.5%。ＰＢＳ是缓冲液，用于清洗、平衡等等。其中的BSA为蛋白质，能够起到保护细胞的作用。BTW，加太多了没好处。
2、不懂。
3、看说明书。
4、细胞和细胞不一样，试验和试验不一样，自己摸索的时间才好用。