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Preclearing the lysates and antibody incubation (3-4h) Always work on ice and keep everything cold. Vortex thoroughly or flip magnetic beads in every step. For incubation of beads use a rotating wheel in a cold room. To collect magnetic beads spin down briefly (300 g, 30 sec) and use a magnetic rack. 11. Wash the magnetic protein A/G beads (ratio 1:1) 3x with RIPA buffer (normal). Per sample use 50 µl protein A and 50 µl protein G in 800 µl RIPA buffer. 12. Thaw lysates on ice and add per 600 µl aliquot: § 100 µl 1% SDS § 100 µl 1% Na-desoxycholate § 100 µl 1.4 M NaCl § 100 µl 10% Triton-X-100 13. Transfer the prepared lysates to the washed Protein A/G beads for preclearing. 14. Incubate the solution at 4 °C for 1 h on a rotating wheel. Afterwards, remove the lysates to a fresh tube. 15. Add the antibody4 to the lysates and rotate over night at 4 °C. 这是染色体免疫共沉淀实验中的几个步骤，请做过的人帮我解释一下好吗，具体是什么意思，要用的仪器试剂，最好能翻译一下啊，多谢了，真的非常着急啊 [ Last edited by 你是我的幸福 on 2012-9-28 at 17:25 ] |
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2楼2012-09-28 19:37:12
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