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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » DNS显色后放置一段时间后颜色变浅，甚至褪色是怎么回事
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水墨蓝

铁虫 (小有名气)

[求助] DNS显色后放置一段时间后颜色变浅，甚至褪色是怎么回事

各位大侠支支招：
    DNS显色后放置一段时间后颜色变浅，甚至褪色是怎么回事？O(∩_∩)O~
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1楼 2012-09-28 08:58:15
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karlgu18

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+3, 感谢非常详细的回答 2012-10-01 06:12:34
提出2个问题：
(1) 你配制DNS的溶液具体是哪几种？可以确定的是DNS配方有不同的版本，但是一定有NaOH。有时候也会有亚硫酸钠。
(2) DNS必须储藏在棕色瓶或者无光的地方，因为DNS(3'5'二硝基水杨酸)上有羟基，本身容易被氧化。
在空气中，时间一长，NaOH会吸收CO2导致碱性变弱，而橘红色必须在碱过量才能发生；亚硫酸钠暴露在空气中也会被慢慢氧化成硫酸钠。DNS(3'5'二硝基水杨酸)上有羟基，本身容易被氧化成酮基。因此时间一长，颜色变浅甚至褪色。
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2楼2012-09-29 14:54:01
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与。怎么知道是在稳定期间？ 2012-10-01 06:13:17
显色和褪色都是氧化还原反应，不必深究这个问题，只要在稳定期间测定就没问题。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2012-09-30 23:46:12
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

显色后定时间点比色，做曲线，横轴时间纵轴为OD差值（含糖量的正对照减去不含糖的负对照）。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2012-10-01 15:40:26
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水墨蓝

铁虫 (小有名气)
★
wizardfan: 金币+1, 谢谢跟进讨论 2012-10-06 06:36:52
引用回帖:
2楼: Originally posted by karlgu18 at 2012-09-29 14:54:01
提出2个问题：
(1) 你配制DNS的溶液具体是哪几种？可以确定的是DNS配方有不同的版本，但是一定有NaOH。有时候也会有亚硫酸钠。
(2) DNS必须储藏在棕色瓶或者无光的地方，因为DNS(3'5'二硝基水杨酸)上有羟基，本身 ...

具体怎么配的不记得了，但是在棕色试剂瓶中保存的，用DNS做还原糖标准曲线时没有发现这个问题，但是做酶反应后显色就出现了褪色现象，有没有出现的假阳性的可能？PS. 酶反应的空白对照不显色
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5楼2012-10-04 23:16:05
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水墨蓝

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2012-09-30 23:46:12
显色和褪色都是氧化还原反应，不必深究这个问题，只要在稳定期间测定就没问题。

但是做标准曲线时没有出现褪色现象。。。
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6楼2012-10-04 23:17:58
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num20062622

银虫 (正式写手)
你用DNS做哪方面的测定的啊楼主..
我要测一些真菌产生的酶活需要用DNS法.
但是操作我有些疑问..
楼主~我求帮助...
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7楼2012-10-07 16:21:25
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水墨蓝

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by num20062622 at 2012-10-07 16:21:25
你用DNS做哪方面的测定的啊楼主..
我要测一些真菌产生的酶活需要用DNS法.
但是操作我有些疑问..
楼主~我求帮助...

测还原糖的含量用的，有问题就说吧，大家互相学习哈
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8楼2012-10-07 22:22:18
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num20062622

银虫 (正式写手)
楼主
我测的是真菌产生的纤维素酶或者一些果胶酶
的活性的
不过是用的DNS法  你是做的哪个方面的?
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9楼2012-10-08 09:28:31
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num20062622

银虫 (正式写手)
楼主 首先实验测还原糖的那个公式都令我很纠结
还有就是对照跟调零
调零是标准空白吧.
对照是用来干嘛的?
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10楼2012-10-08 16:44:49
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