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海贝14

银虫 (小有名气)

[求助] 关于DNAzyme 形成

据文献报道,DNA在Hg2+稳定的条件下可以形成G-四链体,G-四链体可以与hemin结合形成具有辣根过氧化物酶活性的的DNAzyme.很多文献都说在90℃或95℃下退火5-10min后,冷却到室温,这里我想请教两个问题:1.是把DNA一直加热直到90℃或95℃,然后退火5-10min,还是等到温度升到90或95℃,然后退火5-10min。2.冷却到室温,是逐渐冷却还是快速冷却,逐渐冷却时部分互补的双链DNA是不是会复性?
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海贝14

银虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by hb410 at 2012-09-27 22:26:08
hemin与适当的DNA序列就可以形成具有过氧化物酶活性的DNAzyme
汞离子不是必须的 除非需要特殊的目的
建议先将水浴加热到90度 再将样品放入5-10min 再将水浴关闭 让其自然冷却即可
用PCR仪器更好 可以设置盖子温度 ...

我用DNA链是为了测汞的,非常感谢你的指点。
7楼2012-09-28 10:00:48
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杜保群

金虫 (小有名气)

专业微流控

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
呵呵  不是搞这方面不知道  路过  顶一下 愿楼主早日解决之。
需要微流控相关的都可以找我 杜15911012041
2楼2012-09-27 13:42:15
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海贝14

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 杜保群 at 2012-09-27 13:42:15
呵呵  不是搞这方面不知道  路过  顶一下 愿楼主早日解决之。

谢谢。
3楼2012-09-27 13:43:40
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gifttakuya

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
海贝14: 金币+20, ★★★很有帮助, 很有帮助。 2012-09-27 21:27:04
回答:
1:把DNA一直加热直到90℃或95℃,然后退火5-10min;
2:应该逐步冷却,也有报道是立即冷却的,但是应该和你做的核酶体系不一样。
4楼2012-09-27 16:48:17
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