应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于DNAzyme 形成
101/1返回列表
查看: 1951  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

海贝14

银虫 (小有名气)

[求助] 关于DNAzyme 形成

据文献报道，DNA在Hg2+稳定的条件下可以形成G-四链体，G-四链体可以与hemin结合形成具有辣根过氧化物酶活性的的DNAzyme.很多文献都说在90℃或95℃下退火5-10min后，冷却到室温，这里我想请教两个问题：1.是把DNA一直加热直到90℃或95℃，然后退火5-10min,还是等到温度升到90或95℃，然后退火5-10min。2.冷却到室温,是逐渐冷却还是快速冷却，逐渐冷却时部分互补的双链DNA是不是会复性？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

色度色差

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-09-27 13:36:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

杜保群

金虫 (小有名气)

专业微流控

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
呵呵  不是搞这方面不知道  路过  顶一下 愿楼主早日解决之。
赞一下 回复此楼
需要微流控相关的都可以找我 杜15911012041
2楼2012-09-27 13:42:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海贝14

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 杜保群 at 2012-09-27 13:42:15
呵呵  不是搞这方面不知道  路过  顶一下 愿楼主早日解决之。

谢谢。
回复此楼
3楼2012-09-27 13:43:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gifttakuya

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
海贝14: 金币+20, ★★★很有帮助, 很有帮助。 2012-09-27 21:27:04
回答：
1：把DNA一直加热直到90℃或95℃，然后退火5-10min；
2：应该逐步冷却，也有报道是立即冷却的，但是应该和你做的核酶体系不一样。
赞一下 回复此楼
4楼2012-09-27 16:48:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海贝14

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by gifttakuya at 2012-09-27 16:48:17
回答：
1：把DNA一直加热直到90℃或95℃，然后退火5-10min；
2：应该逐步冷却，也有报道是立即冷却的，但是应该和你做的核酶体系不一样。

你好，我还有些不明白，我看文献南开的孔德明教授组用的是heat to 90℃而长春应化所的汪尔康院士组的文章用的是heat at 90℃，所以我就迷茫了，请问你做过这样的课题吗？
赞一下 回复此楼
5楼2012-09-27 18:27:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hb410

金虫 (初入文坛)
hemin与适当的DNA序列就可以形成具有过氧化物酶活性的DNAzyme
汞离子不是必须的 除非需要特殊的目的
建议先将水浴加热到90度 再将样品放入5-10min 再将水浴关闭 让其自然冷却即可
用PCR仪器更好 可以设置盖子温度高于90度 这样样品就不会挥发了 而且也可以控制降温速率
这些条件很容易尝试 做些对照试验很快就可以掌握的
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

海贝14
开心每一天
6楼2012-09-27 22:26:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海贝14

银虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by hb410 at 2012-09-27 22:26:08
hemin与适当的DNA序列就可以形成具有过氧化物酶活性的DNAzyme
汞离子不是必须的 除非需要特殊的目的
建议先将水浴加热到90度 再将样品放入5-10min 再将水浴关闭 让其自然冷却即可
用PCR仪器更好 可以设置盖子温度 ...

我用DNA链是为了测汞的，非常感谢你的指点。
赞一下 回复此楼
7楼2012-09-28 10:00:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sooin

银虫 (小有名气)
应该是在90-95度 保持加热10min以解链，再逐步降温至室温，DNAzyme在缓冷的条件下自发形成。 猝冷的情况也有文献报道，不过用缓冷的多，楼主也可以自己做对照，看哪种情况好。

请问楼主用的是ABTS 还是鲁米诺？
赞一下 回复此楼
8楼2012-09-28 14:30:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

361440594

木虫 (小有名气)

大神
回答一：直接将水加热至90或95℃，然后讲DNA样品放入，变性，退火5-10min。
回答二：冷却至室温时候是逐渐冷却的。
赞一下(1人) 回复此楼
Hero
9楼2012-10-17 21:57:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangxiaomo

银虫 (小有名气)
同意9楼
回复此楼
10楼2021-10-14 14:52:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 海贝14 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +4 gdd2018 2026-08-28 5/250 2026-08-28 12:41 by Tide man
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+5) +12 晴天加油 2026-08-26 13/650 2026-08-28 11:32 by skyjudy
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[职场人生] 学生撞见辅导员送外卖，第二天全班都沉默了 +3 鲸鱼融金_浙江_� 2026-08-22 3/150 2026-08-26 09:01 by zzuzxg
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭