应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于DNAzyme 形成
101/1返回列表
查看: 1632  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

海贝14

银虫 (小有名气)

[求助] 关于DNAzyme 形成

据文献报道，DNA在Hg2+稳定的条件下可以形成G-四链体，G-四链体可以与hemin结合形成具有辣根过氧化物酶活性的的DNAzyme.很多文献都说在90℃或95℃下退火5-10min后，冷却到室温，这里我想请教两个问题：1.是把DNA一直加热直到90℃或95℃，然后退火5-10min,还是等到温度升到90或95℃，然后退火5-10min。2.冷却到室温,是逐渐冷却还是快速冷却，逐渐冷却时部分互补的双链DNA是不是会复性？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

色度色差

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-09-27 13:36:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

杜保群

金虫 (小有名气)

专业微流控

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
呵呵  不是搞这方面不知道  路过  顶一下 愿楼主早日解决之。
赞一下 回复此楼
需要微流控相关的都可以找我 杜15911012041
2楼2012-09-27 13:42:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海贝14

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 杜保群 at 2012-09-27 13:42:15
呵呵  不是搞这方面不知道  路过  顶一下 愿楼主早日解决之。

谢谢。
回复此楼
3楼2012-09-27 13:43:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gifttakuya

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
海贝14: 金币+20, ★★★很有帮助, 很有帮助。 2012-09-27 21:27:04
回答：
1：把DNA一直加热直到90℃或95℃，然后退火5-10min；
2：应该逐步冷却，也有报道是立即冷却的，但是应该和你做的核酶体系不一样。
赞一下 回复此楼
4楼2012-09-27 16:48:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海贝14

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by gifttakuya at 2012-09-27 16:48:17
回答：
1：把DNA一直加热直到90℃或95℃，然后退火5-10min；
2：应该逐步冷却，也有报道是立即冷却的，但是应该和你做的核酶体系不一样。

你好，我还有些不明白，我看文献南开的孔德明教授组用的是heat to 90℃而长春应化所的汪尔康院士组的文章用的是heat at 90℃，所以我就迷茫了，请问你做过这样的课题吗？
赞一下 回复此楼
5楼2012-09-27 18:27:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hb410

金虫 (初入文坛)
hemin与适当的DNA序列就可以形成具有过氧化物酶活性的DNAzyme
汞离子不是必须的 除非需要特殊的目的
建议先将水浴加热到90度 再将样品放入5-10min 再将水浴关闭 让其自然冷却即可
用PCR仪器更好 可以设置盖子温度高于90度 这样样品就不会挥发了 而且也可以控制降温速率
这些条件很容易尝试 做些对照试验很快就可以掌握的
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

海贝14
开心每一天
6楼2012-09-27 22:26:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海贝14

银虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by hb410 at 2012-09-27 22:26:08
hemin与适当的DNA序列就可以形成具有过氧化物酶活性的DNAzyme
汞离子不是必须的 除非需要特殊的目的
建议先将水浴加热到90度 再将样品放入5-10min 再将水浴关闭 让其自然冷却即可
用PCR仪器更好 可以设置盖子温度 ...

我用DNA链是为了测汞的，非常感谢你的指点。
赞一下 回复此楼
7楼2012-09-28 10:00:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sooin

银虫 (小有名气)
应该是在90-95度 保持加热10min以解链，再逐步降温至室温，DNAzyme在缓冷的条件下自发形成。 猝冷的情况也有文献报道，不过用缓冷的多，楼主也可以自己做对照，看哪种情况好。

请问楼主用的是ABTS 还是鲁米诺？
赞一下 回复此楼
8楼2012-09-28 14:30:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

361440594

木虫 (小有名气)

大神
回答一：直接将水加热至90或95℃，然后讲DNA样品放入，变性，退火5-10min。
回答二：冷却至室温时候是逐渐冷却的。
赞一下(1人) 回复此楼
Hero
9楼2012-10-17 21:57:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangxiaomo

银虫 (小有名气)
同意9楼
回复此楼
10楼2021-10-14 14:52:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 海贝14 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +5 ￣^￣゜汗 2026-03-19 7/350 2026-03-22 19:44 by 公瑾逍遥
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分，求调剂 +3 jiajunX 2026-03-22 3/150 2026-03-22 19:32 by brblmd
[考研] 287求调剂 +8 晨昏线与星海 2026-03-19 9/450 2026-03-22 17:01 by i_cooler
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +3 niko- 2026-03-22 3/150 2026-03-22 15:15 by 杨杨杨紫
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 286求调剂 +10 Faune 2026-03-21 10/500 2026-03-21 23:34 by 314126402
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 302求调剂 +12 呼呼呼。。。。 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:29 by ColorlessPI
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +5 纸鱼ly 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:11 by 学员8dgXkO
[考研] 299求调剂 +5 shxchem 2026-03-20 7/350 2026-03-21 17:09 by ColorlessPI
[基金申请] 学校已经提交到NSFC，还能修改吗？ 40+4 babangida 2026-03-19 9/450 2026-03-21 16:12 by babangida
[考研] 268求调剂 +9 简单点0 2026-03-17 9/450 2026-03-21 15:37 by lature00
[考研] 求调剂 +3 白QF 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:12 by zhukairuo
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
[考研] 353求调剂 +3 拉钩不许变 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:56 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
[考研] 广西大学家禽遗传育种课题组2026年硕士招生（接收计算机专业调剂） +3 123阿标 2026-03-17 3/150 2026-03-20 15:58 by 飞行琦
[论文投稿] 申请回稿延期一个月，编辑同意了。但系统上的时间没变，给编辑又写邮件了，没回复 10+3 wangf9518 2026-03-17 4/200 2026-03-19 23:55 by babero
[考研] 材料与化工求调剂 +7 为学666 2026-03-16 7/350 2026-03-19 14:48 by 尽舜尧1
[考研] 0703化学调剂 +5 pupcoco 2026-03-17 8/400 2026-03-19 13:58 by houyaoxu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭