应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 背景不均匀，老板表示结果无效，求可能原因和解决方法。
51/1返回列表
查看: 1084  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wangfeideren

捐助贵宾 (正式写手)

[求助] 背景不均匀，老板表示结果无效，求可能原因和解决方法。

如题。
另 ECL全膜孵育1分钟，应该不是ECL孵育不全的问题

图片1.png
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2012-09-26 15:03:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lengjing1986

木虫 (正式写手)

博士

【答案】应助回帖

这个问题很好解决啊，最可能的就是二抗浓度过大了，一般一抗浓度过高没太大影响。你将二抗稀释比加大，1:20000使用，背景应该能出去。再者，将ECL稀释使用，用PBS稀释，背景会消除的。想你这种图，根本拿不出台面的。如果我爆住这样的图就直接扔掉，免得影响心情。
赞一下 回复此楼
超越别人并不高贵，真实的高贵是超越过去的自己。
4楼2012-09-26 22:54:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wangfeideren: 金币+1, ★有帮助, 谢谢 2012-09-26 15:21:36
每孔样品是什么 需要标注下 蛋白大小 好似特异性条带还是有 就是背景很深 二抗后用TBST多洗几次 或者每次时间延长点
赞一下 回复此楼
生物化学与分子生物学
2楼2012-09-26 15:08:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lengjing1986

木虫 (正式写手)

博士

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+3, 鼓励新虫发帖 2012-09-27 06:11:55
wangfeideren: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢谢谢 2012-09-27 19:47:22
这个问题很好解决啊，最可能的就是二抗浓度过大了，一般一抗浓度过高没太大影响。你将二抗稀释比加大，1:20000使用，背景应该能出去。再者，将ECL稀释使用，用PBS稀释，背景会消除的。想你这种图，根本拿不出台面的。如果我爆住这样的图就直接扔掉，免得影响心情。
赞一下 回复此楼
超越别人并不高贵，真实的高贵是超越过去的自己。
3楼2012-09-26 22:54:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

david0308

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wangfeideren: 金币+1, ★有帮助, 好的 我再试试 2012-09-27 19:47:55
其实很简单的，你的膜整个背景都是脏的，第一有可能的是抗体问题，你得问问其他用这个抗体的人是不是也有同样的状况，一个好用的抗体对于实验是十分有帮助的。再有可能的就是你的transfer buffer 或者TBST太脏了，应该及时换掉，前一段时间我们实验室也出这样的问题了，我们换掉重新配置就OK了。或者也可以多洗有一段时间，如果你确定你的TBST没有问题的话。
赞一下 回复此楼
哈哈
5楼2012-09-27 10:43:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭