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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 滚换扩增，聚丙烯酰胺电泳检测是否成环
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姜红馨520

铜虫 (初入文坛)

[求助] 滚换扩增，聚丙烯酰胺电泳检测是否成环 已有4人参与

滚环扩增，没有扩增出来，怀疑是成环步骤没成功。现用15%的聚丙烯酰胺凝胶电泳检测是否成环。但没有现象，不知哪位大侠做过类似实验，真心求教
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1楼 2012-09-25 12:03:43
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361440594

木虫 (小有名气)

大神
★
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-18 18:38:43
滚环扩增应该是比较简单的实验啊，用电泳就可以验证。你所说的没有现象，应该是没成环导致后续的扩增反应没发生。或是扩增反应的条件不对，没发生扩增反应。
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2楼2012-10-17 22:01:53
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剪爱简爱1120

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我直接用的环状单链DNA进行RCA，但是20%的PAGE什么都检测不出来，环状单链DNA也检测不出来，我用的是SYBR Green 1染料
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3楼2013-11-19 16:33:23
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西大小学霸

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 361440594 at 2012-10-17 22:01:53
滚环扩增应该是比较简单的实验啊，用电泳就可以验证。你所说的没有现象，应该是没成环导致后续的扩增反应没发生。或是扩增反应的条件不对，没发生扩增反应。

你做成功了吗？有些问题想请教你啊
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4楼2014-09-11 20:30:52
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小绘64

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

成环后条带在原来条带上方。看不到成环条带或者成环效率低，加大上样量看看
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5楼2014-10-16 10:11:51
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小绘64

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

貌似楼上都是染色看条带的。我跑的是变性PAGE，上样量要大，直接荧光板上紫外灯下看条带。
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6楼2014-10-16 10:13:46
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木木一家人

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

sybe green不是染双链的嘛？
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7楼2015-04-10 09:36:22
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wumei34324

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以直接用SYBR II染色，测荧光

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8楼2016-04-10 00:17:50
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936617598

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 西大小学霸 at 2014-09-11 20:30:52
你做成功了吗？有些问题想请教你啊...

我也在做这方面实验，你现在做出来了吗？我们可以交流交流
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9楼2017-05-18 21:32:23
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