[求助] 影响竞争Elisa结果的因素 已有1人参与

最近在做小分子抗体的制备，确定产生的抗体是否是针对小分子的特异性的方法是用竞争Elisa检测小分子是否具有明显的竞争趋势。之前已经做了3个小分子化合物的抗体制备，其中有两个化合物三免血清测定小分子的竞争趋势不明显，而第三个化合物的免疫血清竞争趋势稍微好一些。当然竞争趋势的好坏最根本的原因是抗原制备的问题。在此先不谈抗原制备方面的问题，想对于竞争Elisa中影响检测结果的因素问一下大家，到底哪些因素会影响竞争Elisa的结果？？ 目前我关注的是小分子的溶剂问题。对于有些小分子不能溶于水，只能用DMSO等有机溶剂进行溶解。在做竞争Elisa的时候，有时候可能在一定小分子浓度梯度范围做不出竞争，所以要增大小分子的浓度范围，而小分子的浓度越大，小分子中含有的有机试剂的比例就会越大（如将小分子浓度提至1mg/ml 或者0.5mg/ml），这就会导致在整个检测体系中，各个检测孔中的反应体系是不同，最终可能会得到一个假阳性的结果，也就是在一个较大的小分子浓度梯度范围内是有竞争的。 对于Elisa这一块，我是比较弱的，没有任何经验，所以想请教一下各位，是不是小分子的溶剂真的会对检测结果有如此大的影响（尤其当小分子的浓度梯度设的比较大的时候，像1mg/ml或者0.5mg/ml）？ 最后谢谢大家，希望在这方面有经验的朋友多给点建议。

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