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爱莫若月

木虫 (小有名气)

[求助] 关于柱层析,点板~

本人小硕,近期在做一株生防细菌的活性物质分离~遇到一些问题还望各位赐教啊~
1.常说的点板,也就是点硅胶板的时候用的展开液和喷板的时候那个溶液,我看到不同的文献和实验室用的都不一样,想问问这个是怎么确定的啊?不同的溶剂有什么区别?怎么才能把这个板做好呢?
2.看到很多文献就是用不同的有机溶剂去萃取,想知道不同的溶剂里萃取的东西有什么区别呢?每一种大概能萃取到什么东西呢?比如乙酸乙酯,石油醚,正丁醇,萃取到的分别是什么呢?怎么才能把我的菌里面的东西都覆盖萃取到呢?
3.关于硅胶柱,凝胶柱,反相柱这三个分别有什么功能呢?优点和缺点是怎样的?怎么配合才能起到比较好的作用呢?还有就是怎么上样,制备样品呢?
4.关于柱子,我看了一些资料,柱子的种类很多,一看就晕了~这个又该怎么选择呢?不同的有啥区别呢?
5.如果这些想跟其他的手段联用,该怎么弄呢?比如加上液质联用,HPLC等等
由于本人完全是个新手,老板安排了这部分内容又不得不做,所以问题问的比较幼稚的还望见谅啊~不过我觉得对于一个初学者,可能很多人也会遇到这样的问题,所以,如果有比较在行的朋友~还请多多指教啊~如有经典的书籍或者文献,能分享的那就最好了!小弟先谢谢各位了~
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ywj1986

铜虫 (正式写手)

★
karl2100: 金币+1, 谢谢回帖! 2014-01-12 01:37:39
个人感觉你现在最该关心的就是你们实验室用的是什么柱子。根据柱子的性质再进一步确定下一步的展开剂得问题。比如说硅胶柱,属于弱酸性的。我们一般有薄层色谱硅胶板,还有用硅胶粉自己装的硅胶柱。做植化的还会有大孔树脂的,等等。对于硅胶柱,我们用的展开剂都是正向的,极性小得物质走的最快,极性大的物质在后面最后出来。展开剂的比例也是需要自己一点点摸索的。根据薄层板Rf值的大小,来调节相应的展开剂比例。大柱子的展开剂极性一般比走薄层板的小1.5-2倍。

对于液质联用,我用的是反向展开剂。极性大的东西先出来,极性小的后面出来,可以根据物质的出峰时间,以及所对应的M来判定你需要的物质出来的顺序。
不知道你是用哪一种类型的一起要来分离你的产物。总之所有的东西都需要你根据实际情况实际分析。
正如楼上所说,你问的这些东西其实很多书上都有
低调中努力前行
7楼2014-01-11 18:58:58
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查看全部 8 个回答

独步青云

新虫 (职业作家)

术中小生

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢参与。 2012-09-25 09:13:53
你的问题真是太多了。好多问题直接参阅天然药物化学书都有的。
2楼2012-09-23 15:28:43
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czfscf

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
问题太多,不想回答怎么办
Ecological Genomics;the scientific walking hormone
3楼2012-09-23 17:08:28
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爱莫若月

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 独步青云 at 2012-09-23 15:28:43
你的问题真是太多了。好多问题直接参阅天然药物化学书都有的。

呵呵~新手入门,不得不问清楚啊~你说的那个书有电子版吗
4楼2012-09-24 21:27:55
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