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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 关于柱层析，点板~
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爱莫若月

木虫 (小有名气)

[求助] 关于柱层析，点板~

本人小硕，近期在做一株生防细菌的活性物质分离~遇到一些问题还望各位赐教啊~
1.常说的点板，也就是点硅胶板的时候用的展开液和喷板的时候那个溶液，我看到不同的文献和实验室用的都不一样，想问问这个是怎么确定的啊？不同的溶剂有什么区别？怎么才能把这个板做好呢？
2.看到很多文献就是用不同的有机溶剂去萃取，想知道不同的溶剂里萃取的东西有什么区别呢？每一种大概能萃取到什么东西呢？比如乙酸乙酯，石油醚，正丁醇，萃取到的分别是什么呢？怎么才能把我的菌里面的东西都覆盖萃取到呢？
3.关于硅胶柱，凝胶柱，反相柱这三个分别有什么功能呢？优点和缺点是怎样的？怎么配合才能起到比较好的作用呢？还有就是怎么上样，制备样品呢？
4.关于柱子，我看了一些资料，柱子的种类很多，一看就晕了~这个又该怎么选择呢？不同的有啥区别呢？
5.如果这些想跟其他的手段联用，该怎么弄呢？比如加上液质联用，HPLC等等
由于本人完全是个新手，老板安排了这部分内容又不得不做，所以问题问的比较幼稚的还望见谅啊~不过我觉得对于一个初学者，可能很多人也会遇到这样的问题，所以，如果有比较在行的朋友~还请多多指教啊~如有经典的书籍或者文献，能分享的那就最好了！小弟先谢谢各位了~
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1楼 2012-09-23 13:48:50
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独步青云

新虫 (职业作家)

术中小生

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢参与。 2012-09-25 09:13:53
你的问题真是太多了。好多问题直接参阅天然药物化学书都有的。
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2楼2012-09-23 15:28:43
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czfscf

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
问题太多，不想回答怎么办
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Ecological Genomics；the scientific walking hormone
3楼2012-09-23 17:08:28
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爱莫若月

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 独步青云 at 2012-09-23 15:28:43
你的问题真是太多了。好多问题直接参阅天然药物化学书都有的。

呵呵~新手入门，不得不问清楚啊~你说的那个书有电子版吗
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4楼2012-09-24 21:27:55
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氢化大雪

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢参与。 2012-09-25 09:14:02
关于薄层和柱层析我有一些资料，都是我自己收集整理的作为新手入门很有参考价值。你可以先看一下http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=4921780
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美酒香茗
5楼2012-09-24 21:58:25
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小欣1211

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
萃取是根据极性的，石油醚极性最小，萃取出来的都是小极性的色素之类的，然后是乙酸乙酯，最后是正丁醇，那么点样跑版也是根据这个极性的，比如要是点乙酸乙酯部分，极性比较小，可以试试石油醚和乙酸乙酯，或者石油醚和丙酮，这个比例是试出来的，然后是过柱子，过什么柱子是要看你要分离的成分的，具体我也不知道，这个书上应该都有的，看看就行了，我只知道这些了
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呵呵~~
6楼2012-09-25 10:08:29
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ywj1986

铜虫 (正式写手)
★
karl2100: 金币+1, 谢谢回帖！ 2014-01-12 01:37:39
个人感觉你现在最该关心的就是你们实验室用的是什么柱子。根据柱子的性质再进一步确定下一步的展开剂得问题。比如说硅胶柱，属于弱酸性的。我们一般有薄层色谱硅胶板，还有用硅胶粉自己装的硅胶柱。做植化的还会有大孔树脂的，等等。对于硅胶柱，我们用的展开剂都是正向的，极性小得物质走的最快，极性大的物质在后面最后出来。展开剂的比例也是需要自己一点点摸索的。根据薄层板Rf值的大小，来调节相应的展开剂比例。大柱子的展开剂极性一般比走薄层板的小1.5-2倍。

对于液质联用，我用的是反向展开剂。极性大的东西先出来，极性小的后面出来，可以根据物质的出峰时间，以及所对应的M来判定你需要的物质出来的顺序。
不知道你是用哪一种类型的一起要来分离你的产物。总之所有的东西都需要你根据实际情况实际分析。
正如楼上所说，你问的这些东西其实很多书上都有
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低调中努力前行
7楼2014-01-11 18:58:58
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ywj1986

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 小欣1211 at 2012-09-25 10:08:29
萃取是根据极性的，石油醚极性最小，萃取出来的都是小极性的色素之类的，然后是乙酸乙酯，最后是正丁醇，那么点样跑版也是根据这个极性的，比如要是点乙酸乙酯部分，极性比较小，可以试试石油醚和乙酸乙酯，或者石油 ...

我有时候会用点甲醇调极性。但是一用那个东西就脑袋痛。
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低调中努力前行
8楼2014-01-11 19:00:21
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