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LM倾听

金虫 (小有名气)

[求助] 薄层层析问题

本人准备做薄层层析
用买来的硅胶板,打算:展着剂用氯仿、 甲醇和水(体积比为65∶ 25∶ 4) ,显色剂用含 5 %浓硫酸的甲醇溶液。
现有几个问题求教:
1.用显色剂含 5 %浓硫酸的甲醇溶液喷洒后需要加热处理15分钟吗?还有哪些通用显色剂?
2.我是想将分离的某个条带洗脱下来,洗脱液该如何选择?
3. 喷完显色剂后,会对自己需要洗脱的条带成分产生破坏吗?
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独步青云

新虫 (职业作家)

术中小生

【答案】应助回帖

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LM倾听: 金币+5, ★★★很有帮助, 非常感谢您的意见 2012-09-20 21:52:51
1 显色剂一般是浓硫酸或者10%硫酸-乙醇溶液。后者一般多在105度时加热方能显色。
2 你是想做薄层制备是吧?如果这样,用跟你TLC检测的展开剂展开,前提是能与其它的杂质分得很开,这样做薄层制备才会有效果。把你要的条带刮下来,装个小开口柱,用甲醇洗脱即可。
3 喷显色剂显色,就是化学反应过程,原来的物质被络合或氧化等。就不能再用了。
建议你做薄层制备时,所分离的东西如果没有荧光或者254nm下暗斑,在板子的两侧各切下一条(含玻璃),把它们显色后对比大板子的位置来寻找你要的条带。
2楼2012-09-20 21:35:52
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