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linlishare

新虫 (初入文坛)

[求助] 用显色法测定总黄酮含量时为啥不变色

测茶油黄酮含量时加完硝酸铝和氢氧化钠后都不出现变红的现象反而有乳白色现在，是为什么呀
实验药品：正己烷、体积比3:2甲醇溶液、60%的乙醇溶液、5%Na2CO3溶液、
          10%Al（NO3）3溶液、1mol/LNaOH溶液、30%乙醇溶液
样品溶液的制备：称取1.000g油脂样品，用5ml正己烷溶解样品，振荡摇匀，加入2ml甲醇溶液（体积比3:2），振荡2min，取下层溶液，再加入甲醇溶液，重复上述操作3次，得到样品溶液。
实验方法：采用NaNO2-Al(NO3)3比色测定法。 取3ml样品溶液，用60%的乙醇溶液定容至5ml（参比液为5ml 60%乙醇溶液），摇匀，加入0.3ml 5%Na2CO3溶液，静置5min，再加入0.3ml 10%Al（NO3）3溶液，摇匀静置6min，加入4ml 1mol/LNaOH溶液和0.4ml 30%乙醇溶液定容至10ml，混匀静置10min，在510nm波长下测定吸光度。
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1楼 2012-09-19 17:02:16
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紫衣轻骑

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2012-10-18 21:48:51
加入0.3ml 5%Na2CO3溶液！
应为NaNO2。
乳白色应为Al（OH）3胶体。
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2楼2012-10-17 13:33:18
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sunnymen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2012-10-19 22:35:50
硝酸铝法测定黄酮的前提条件是溶液时是水溶液或者是与水互溶的溶剂，LZ你的样品室油脂，而且还用到了正己烷。这些都是不与水互溶的，试剂一加进去就会浑浊变为乳浊液，这样的液体根本就不能用比色法测定。当初我用乙酸乙酯提取食用菌黄酮测定时也遇到过这样的问题，经过很多次实验改进，最后改为三氯化铝法。当时我参考的文献是，顾芙琳.比色法测定荆芥中黄酮含量[J].齐鲁药事，2009,28(7)：403-405.
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3楼2012-10-19 16:49:01
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xdz1978

至尊木虫 (文坛精英)

持之以恒！

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2012-10-19 22:35:59
经典方法是加亚硝酸钠，起还原作用

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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一身正气，两袖清风，三餐温饱，四大皆空！
4楼2012-10-19 20:43:55
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