24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 1505  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

晴微雨浓

铜虫 (初入文坛)

[求助] 固氮根瘤菌基因组DNA的提取

请问有人提取过根瘤菌基因组DNA?如果有的话请问用的是哪家公司的试剂盒?
有没有人用生工的Ezup柱式基因组DNA抽提试剂盒提过?为什么我用它家的试剂盒提的有杂带?
我的菌液是挑取的根瘤菌单克隆。摇菌后用试剂盒提的基因组DNA,而且扩增的nifH基因也有杂带,是因为基因组DNA提的不纯吗?还是因为别的原因?
请有相关知识的童孩们多多指教!!!

这个是提取的固氮菌基因组DNA,不同泳道是不同的克隆



这个是扩增的nifH基因,条带大小是320bp,可是上面有两条杂带,这是什么原因啊?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaoghit

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


晴微雨浓: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-09-21 08:13:15
这个我没扩增过,但是这是比较共性的问题,通过优化体系或者引物上能够解决的,但不建议将DNA纯化,否则会损失生物信息。祝你顺利!
天道酬勤!
4楼2012-09-20 18:43:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

zhaoghit

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
晴微雨浓: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-09-20 09:02:04
不应该是DNA问题,你还要从PCR上找问题,特异性不强造成,扩增出非特异片段,建议修改体系或调整条件,增加特异性扩增
天道酬勤!
2楼2012-09-20 08:52:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晴微雨浓

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhaoghit at 2012-09-20 08:52:40
不应该是DNA问题,你还要从PCR上找问题,特异性不强造成,扩增出非特异片段,建议修改体系或调整条件,增加特异性扩增

这个出现非特异性扩增的问题,在之前我从土壤中提取细菌基因组DNA,然后进行固氮菌nifH基因的扩增时就一直存在,也没有完全解决。我一直认为是因为我用的是兼并引物。
不知道您有没有对固氮菌nifH基因进行过扩增,所用的引物序列是什么?
3楼2012-09-20 09:10:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晴微雨浓

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zhaoghit at 2012-09-20 18:43:05
这个我没扩增过,但是这是比较共性的问题,通过优化体系或者引物上能够解决的,但不建议将DNA纯化,否则会损失生物信息。祝你顺利!

谢谢了哈!!!
5楼2012-09-21 08:13:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料299专硕求调剂 +16 +21 2026-04-09 16/800 2026-04-14 17:06 by jiangguiquan11
[考研] 药学求调剂 +8 喽哈加油 2026-04-14 10/500 2026-04-14 17:05 by 张zhihao
[考研] 恳请有学校收留 +3 柯淮然 2026-04-12 3/150 2026-04-14 16:25 by 逆水乘风
[考研] 药学305求调剂 +10 玛卡巴卡boom 2026-04-10 10/500 2026-04-14 15:55 by zs92450
[考研] 297求调剂 +23 ORCHID1 2026-04-10 26/1300 2026-04-14 13:52 by 陈皮皮
[考研] 290求调剂 +18 柯淮然 2026-04-12 20/1000 2026-04-13 12:56 by cyh—315
[考研] 339求调剂 +4 hanwudada 2026-04-12 4/200 2026-04-13 12:03 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂 +9 吃口冰激凌 2026-04-07 9/450 2026-04-13 08:46 by 紫曦紫棋
[考研] +10 李多米lee. 2026-04-12 11/550 2026-04-12 22:58 by yuyin1233
[考研] 346分,工科0854求调剂,专硕 +6 moser233 2026-04-12 7/350 2026-04-12 22:11 by fqwang
[考研] 296求调剂 +14 汪!?! 2026-04-08 15/750 2026-04-11 20:28 by dongdian1
[考研] 求调剂,一志愿大连理工大学354分 +5 雨声余生 2026-04-11 6/300 2026-04-11 16:12 by 雨声余生
[考研] 085410 273分调剂 +4 X1999 2026-04-09 4/200 2026-04-11 13:05 by pies112
[考研] 297求调剂 +9 Kwgyz 2026-04-09 9/450 2026-04-11 10:09 by zhq0425
[考研] 0854调剂 +4 长弓傲 2026-04-09 4/200 2026-04-11 09:18 by 猪会飞
[考研] 265求调剂 +12 风说她早忘了 2026-04-10 13/650 2026-04-10 18:56 by chemisry
[考博] 博士自荐 +7 可可小胖 2026-04-08 7/350 2026-04-10 08:28 by kimhero
[考研] 085601初试330分找调剂 +10 流心奶黄包l 2026-04-09 10/500 2026-04-10 08:14 by Sammy2
[考研] 材料307分求大佬组收留 +17 Hll胡 2026-04-07 17/850 2026-04-09 10:53 by liuhuiying09
[考研] 考研求调剂 +4 雯??? 2026-04-08 4/200 2026-04-08 21:44 by 土木硕士招生
信息提示
请填处理意见