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piaoran168

金虫 (正式写手)

[求助] 薄层色谱,如何怎样提高分离度

最近一直在做实验,也就是做一个氨基酸产品中的有关物质,是强极性的物质,用薄层色谱(TLC),药典上类似的物质大都用这个方法,所以现在这个产品也打算用这个方法的,但是做了很多次,用正丙醇:浓氨水=2:1做展开剂的,在系统适用性实验时候,是分开了,但是两个点的距离很近,约5毫米,Rf值分别为0.13和0.08,分离度约1.3,现在想让它们距离再分开点,怎么办啊?
   看了药典的指导原则,Rf一般在0.2-0.8范围,分离度大于2,在调整展开剂问题上,有三点困惑的:
(1)目前我做的产品,用HPLC已经显示有一个已知杂质,但是含量很低,而想尝试着用TLC检测最好能检测出来节省成本,但是在这个展开剂的体系下,样品只显示一个点,未显示其他的杂质存在,是不是说明这个体系可以用,但是由于板的灵敏度不够,所以才检测不出来啊?这个体系还有必要再尝试下去吗?
(2)是不是有系统适用性试验有分开的迹象,就在这个展开剂的体系调整比例就好了啊,不用再换其他的展开剂吗?
(3)如果换其他的展开剂,该如何调整呢?是增大极性还是降低极性?
  以前对于薄层只是很浅薄的了解,没有想到学问还那么多,有经验的虫友帮忙来指点一下啊!目前自己做的情况有点盲目,但是还是硬头皮做下去,领导天天在那要效率效率,压力好大,做梦都在配展开剂,郁闷!今天两个手也茚三酮污染了,洗不掉只能等待吸收了,还打算明年要孩子呢,怎么办,越做越郁闷,越做越害怕伤身体!

[ 来自科研家族 快乐家族 ]
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氢化大雪

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

薄层层析法的检测灵敏度很差的,含量低了就不会显色了。薄层色谱技术请看一下这里http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=4921780
美酒香茗
23楼2012-09-22 22:54:26
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piaoran168

金虫 (正式写手)

为嘛没有人回复呢,自己在顶起!
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2楼2012-09-19 08:14:49
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478687396

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢! 2012-09-19 09:15:44
piaoran168: 金币+1, 有帮助, 谢谢 2012-09-19 16:12:15
用粒度更细的硅胶板试试,或者改变层析液溶液配比试试,说不定就可以的。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2012-09-19 08:56:23
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piaoran168

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 478687396 at 2012-09-19 08:56:23
用粒度更细的硅胶板试试,或者改变层析液溶液配比试试,说不定就可以的。

你好,今天换了配比了,每个点的Rf值都增加了,但是系统还是没有分开,点之间距离和分离度都几乎不变,而且点没有之前做的圆润,请问还有什么办法在处理呢?没有信心做下去了,
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4楼2012-09-19 16:15:14
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