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姚世伦

木虫 (小有名气)

[交流] 紫外扫描显示在212nm处最大吸收波长,为什么进液相时在212nm出检测不到出峰? 已有13人参与

最近做一个甾体分析,紫外扫描显示在212nm处最大吸收波长,进液相,C18柱,流动相选择乙腈:水=60:40,检测波长212nm,没有检测到出峰,这是为什么啊?问人说可能是我甾体极性太小,分子量又在400左右,在流动相中溶解度太小,进样量有限,检测浓度太低,检测不出来!不知道是不是这个原因,有没有人碰到类似问题,求解释!!!!还有像甾体是否应该使用整箱柱来检测啊?
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姚世伦

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by liuzhaomin at 2012-09-15 22:26:39
紫外扫描的时候,用几个不同浓度的样品,看相应是否随浓度变化,有可能是溶剂的吸收。还有,最好走个梯度,最后用高比例的有机相冲洗,甾体保留较强

有道理,可能是溶剂吸收峰,还请问一下,甾体上没有特殊结构,就是几个孤立的双键,其他都是环状饱和结构,向这样结构的物质一般在多少nm有吸收峰啊?流动相的配比一般是多少呢?实验室只有反向柱的情况下!
4楼2012-09-16 09:27:19
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姚世伦

木虫 (小有名气)

最后一句打错了:是正向柱
2楼2012-09-15 20:44:10
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
leecius: 金币+1, 谢谢参与。 2012-09-16 20:56:32
紫外扫描的时候,用几个不同浓度的样品,看相应是否随浓度变化,有可能是溶剂的吸收。还有,最好走个梯度,最后用高比例的有机相冲洗,甾体保留较强
3楼2012-09-15 22:26:39
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-09-21 00:38:13
引用回帖:
4楼: Originally posted by 姚世伦 at 2012-09-16 09:27:19
有道理,可能是溶剂吸收峰,还请问一下,甾体上没有特殊结构,就是几个孤立的双键,其他都是环状饱和结构,向这样结构的物质一般在多少nm有吸收峰啊?流动相的配比一般是多少呢?实验室只有反向柱的情况下!...

有可能在300nm以上有吸收了   紫外的响应一般不大好  不过你可以试试  不行换成蒸发光散射检测器 或者质谱
5楼2012-09-16 09:37:10
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