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施子墨

金虫 (正式写手)

[求助] 蛋白marker

我想知道的是
买了 marker 加的时候是不是只需要沸浴
不用跟蛋白样品一样加溴酚蓝
还有就是只需要加3ul就可以了吗？
抗体的稀释   根据说明书用脱脂奶粉稀释就行吗？谢谢
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1楼 2012-09-15 12:51:56
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施子墨

金虫 (正式写手)
太简单了？大家都不愿意说吗
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2楼2012-09-15 13:28:57
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advancelove

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
只需沸水浴，大概5分钟，不需要加溴酚蓝，一般的是加10ul
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提升我周围的人的幸福额度及其价值，并在此基础上超越自我---这是我的人生追求！
3楼2012-09-15 16:11:55
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lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2 2012-09-17 13:48:40
marker我们买的那种是直接从20度拿出融化后就可以用的，至今还没有听说marker需要加溴酚蓝的，另外上样量我一般都是6ul左右，3ul也行咯。
抗体的稀释你可以买一抗和二抗稀释液分别取稀释一抗和二抗，同样你也可以用3%的脱脂奶粉的TBST稀释。
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生物化学与分子生物学
4楼2012-09-15 16:37:17
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jl860822

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 是啊，直接看说明书就好了 2012-09-17 13:49:07
蛋白Marker看是不是预染的，你买回来看说明书吧，有些是预染的，可以直接用，抗体用TBST和脱脂奶粉稀释都可以的
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施子墨
5楼2012-09-17 08:33:39
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sarah-miao

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-18 15:46:36
一般买的都是预染的蛋白MAKER，买回来从冰箱-20直接拿出来用，如果只是跑胶然后染色脱色观察，一般七八微升即可，如果是western，建议用10微升，抗体的稀释直接用5%的脱脂乳，买那种光明的脱脂乳就行，自己回来加PBST稀释就行
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施子墨
6楼2012-09-18 10:06:55
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施子墨

金虫 (正式写手)
1949stone: 没关系吧 溴酚蓝 都加啊 2012-09-22 08:37:45
引用回帖:
3楼: Originally posted by advancelove at 2012-09-15 16:11:55
只需沸水浴，大概5分钟，不需要加溴酚蓝，一般的是加10ul

我的marker跑不出来是不是跟加了溴酚蓝有关系？
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7楼2012-09-22 08:29:23
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施子墨

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lidonghong at 2012-09-15 16:37:17
marker我们买的那种是直接从20度拿出融化后就可以用的，至今还没有听说marker需要加溴酚蓝的，另外上样量我一般都是6ul左右，3ul也行咯。
抗体的稀释你可以买一抗和二抗稀释液分别取稀释一抗和二抗，同样你也可以用 ...

谢啦
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8楼2012-09-22 08:30:41
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施子墨

金虫 (正式写手)
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引用回帖:
5楼: Originally posted by jl860822 at 2012-09-17 08:33:39
蛋白Marker看是不是预染的，你买回来看说明书吧，有些是预染的，可以直接用，抗体用TBST和脱脂奶粉稀释都可以的

9楼2012-09-22 08:31:07
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施子墨

金虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by sarah-miao at 2012-09-18 10:06:55
一般买的都是预染的蛋白MAKER，买回来从冰箱-20直接拿出来用，如果只是跑胶然后染色脱色观察，一般七八微升即可，如果是western，建议用10微升，抗体的稀释直接用5%的脱脂乳，买那种光明的脱脂乳就行，自己回来加PB ...

10楼2012-09-22 08:31:31
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