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施子墨

金虫 (正式写手)

[求助] 蛋白marker

我想知道的是
买了 marker 加的时候是不是只需要沸浴
不用跟蛋白样品一样加溴酚蓝
还有就是只需要加3ul就可以了吗?
抗体的稀释   根据说明书用脱脂奶粉稀释就行吗?谢谢
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施子墨

金虫 (正式写手)

太简单了?大家都不愿意说吗
2楼2012-09-15 13:28:57
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施子墨

金虫 (正式写手)

1949stone: 没关系吧 溴酚蓝 都加啊 2012-09-22 08:37:45
引用回帖:
3楼: Originally posted by advancelove at 2012-09-15 16:11:55
只需沸水浴,大概5分钟,不需要加溴酚蓝,一般的是加10ul

我的marker跑不出来是不是跟加了溴酚蓝有关系?
7楼2012-09-22 08:29:23
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施子墨

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lidonghong at 2012-09-15 16:37:17
marker我们买的那种是直接从20度拿出融化后就可以用的,至今还没有听说marker需要加溴酚蓝的,另外上样量我一般都是6ul左右,3ul也行咯。
抗体的稀释你可以买一抗和二抗稀释液分别取稀释一抗和二抗,同样你也可以用 ...

谢啦
8楼2012-09-22 08:30:41
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施子墨

金虫 (正式写手)

送鲜花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by jl860822 at 2012-09-17 08:33:39
蛋白Marker看是不是预染的,你买回来看说明书吧,有些是预染的,可以直接用,抗体用TBST和脱脂奶粉稀释都可以的

9楼2012-09-22 08:31:07
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施子墨

金虫 (正式写手)

送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by sarah-miao at 2012-09-18 10:06:55
一般买的都是预染的蛋白MAKER,买回来从冰箱-20直接拿出来用,如果只是跑胶然后染色脱色观察,一般七八微升即可,如果是western,建议用10微升,抗体的稀释直接用5%的脱脂乳,买那种光明的脱脂乳就行,自己回来加PB ...

10楼2012-09-22 08:31:31
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施子墨

金虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by sarah-miao at 2012-09-18 10:06:55
一般买的都是预染的蛋白MAKER,买回来从冰箱-20直接拿出来用,如果只是跑胶然后染色脱色观察,一般七八微升即可,如果是western,建议用10微升,抗体的稀释直接用5%的脱脂乳,买那种光明的脱脂乳就行,自己回来加PB ...

好的
11楼2012-09-22 08:57:03
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