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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 克隆出问题了，大家帮忙分析下
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kk26

木虫 (小有名气)
肯定是模板问题
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坚持的保持一种热爱！
11楼2012-09-13 08:00:46
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我觉得你的模板放的时间太长了。。。极有可能是模板的问题。。。
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keepon
12楼2012-09-13 09:09:15
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aqingkl

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也是6月份扩出基因了，然后做连接转化，当时转化没有成功，我就生病了 ，我就没有继续做回家休息暑假，等开学现在来了再做pcr，死活p不出来了，都是一样的东西，哎，悲催
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13楼2012-09-13 11:10:35
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junminh

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
检验下原来的实验记录，尽可能的重复原来的条件实验
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14楼2012-09-13 14:26:17
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考研生涯

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这种情况应该PCR出现问题，建议从新PCR，酶切连接
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15楼2012-09-13 14:55:22
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lmq613

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-10-23 15:45:49
我也出现这种问题，PCR出来的片段大小是预测的大小，但连入克隆载体，要么不长斑，要么长出的斑，菌液PCR结果就比插入前少1000bp，测序也确实比目的基因少了中间的1000bp左右，请大家指教，谢谢！
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16楼2012-10-23 15:40:48
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