24小时热门版块排行榜    

查看: 5631  |  回复: 21

wt3532

木虫 (著名写手)

涛声依旧

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xiaoyang123: 金币+5, ★★★很有帮助, 非常感谢,是PFGE么? 2012-09-14 11:08:31
以前学过,大分子量DNA电泳可能需要脉冲场电泳,查查这方面资料吧,还有好多文献上应该有这方面内容,查点文献
11楼2012-09-13 10:16:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoyang123

金虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by jl860822 at 2012-09-13 08:58:22
有48kb Marker,我以前用过,但是貌似也不太适合你的质粒

请问你用的48kb Marker是什么牌子的呢,我的质粒如果大小在48kb以下,或许可以用这个marker鉴定一下。
12楼2012-09-13 12:25:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoyang123

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 无疆@行者 at 2012-09-11 14:07:32
低拷贝质粒一般我是提取10ml菌液,然后酶切鉴定,大的MARKER 我们用的是TAKALA DL15 000....

请问提10mL菌液是用碱裂解法手提,还是用试剂盒提的
  曾经听说过静置培养(不摇)可以提高质粒拷贝数,你对此是怎么看的呢?
  提质粒摇菌到什么生长时期最合适,对质粒提取效果的影响大不大呢?
  多谢!
13楼2012-09-13 12:28:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

无疆@行者

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
xiaoyang123: 金币+12, ★★★很有帮助, 感谢~~ 2012-09-14 11:09:10
引用回帖:
13楼: Originally posted by xiaoyang123 at 2012-09-13 12:28:54
请问提10mL菌液是用碱裂解法手提,还是用试剂盒提的
  曾经听说过静置培养(不摇)可以提高质粒拷贝数,你对此是怎么看的呢?
  提质粒摇菌到什么生长时期最合适,对质粒提取效果的影响大不大呢?
  多谢!...

用的是qiangen的盒子提的,一般1:100接种的,16到20个小时 ,时间长点好。静置培养没用过,个人觉得不是很靠谱
14楼2012-09-13 18:29:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chui2004

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
超螺旋Marker不是有开环的吗?这样跑出来的电泳不好看吧,也不好判断吧!
相信自己,一定能成功!
15楼2012-09-13 22:16:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jl860822

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

★ ★
xiaoyang123: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-09-14 15:56:44
引用回帖:
12楼: Originally posted by xiaoyang123 at 2012-09-13 12:25:32
请问你用的48kb Marker是什么牌子的呢,我的质粒如果大小在48kb以下,或许可以用这个marker鉴定一下。...

记得好像是Fermentas的Marker,记不太清楚了,你上Fermentas的官网看看呗
16楼2012-09-14 08:34:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoyang123

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by gwd0312 at 2012-09-11 10:34:07
你可以试着将提取的质粒浓缩一下,酶切时加大用量,选择合适的酶单/双酶切!

如果用旋转真空浓缩,35℃,是否会影响质粒的结构呢,你觉得哪种浓缩方法更合适呢?
17楼2012-09-14 11:06:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”

【答案】应助回帖

★ ★ ★
xiaoyang123: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-09-14 15:57:09
引用回帖:
17楼: Originally posted by xiaoyang123 at 2012-09-14 11:06:39
如果用旋转真空浓缩,35℃,是否会影响质粒的结构呢,你觉得哪种浓缩方法更合适呢?...

不会的,我们经常用抽真空浓缩仪!
持之以恒、永不放弃!
18楼2012-09-14 11:12:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maothree54

至尊木虫 (知名作家)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
xiaoyang123: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-09-14 15:58:06
Takara公司就有一种广泛Marker,你可以试一下,我们都是用这个来电泳的
多动大脑,严谨的搞科研!
19楼2012-09-14 13:15:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

请酶切后再鉴定其分子量大小。
20楼2012-09-14 13:16:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xiaoyang123 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +7 scalable 2026-08-24 7/350 2026-08-24 23:01 by anata1209
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 5/250 2026-08-24 21:51 by BZKMTicpDhFj
[基金申请] 人气不行了 +10 fansofjerry 2026-08-21 10/500 2026-08-24 21:03 by zhanghaozhu
[基金申请] 我面上完蛋了 +9 且听虎啸 2026-08-20 10/500 2026-08-24 20:08 by 苦寒来香
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +21 koalala 2026-08-24 24/1200 2026-08-24 19:25 by 家与远方
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +17 羊腰板 2026-08-21 19/950 2026-08-24 16:52 by iaeyuan
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +6 炎黄贵胄 2026-08-22 7/350 2026-08-24 11:58 by 6543yes
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[基金申请] 明天应该可查了!? +4 chengyan1220 2026-08-23 4/200 2026-08-24 08:47 by gloomy6159
[基金申请] 什么时候开奖? +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见