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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » ph 变后，出峰时间也变了，导致物质分不开！
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704361326

金虫 (正式写手)

恩恩

[求助] ph 变后，出峰时间也变了，导致物质分不开！

急求解一个问题：
乙腈：水（三乙胺至ph=11.9）=70：30，流速：0.5ml/min，进样量：10微。
我以前按以上条件可以将我的样品中的两个物质分开，物质一：7.6min出峰，物质二：9.28min。但ph=11.9对柱子的损害太大，导致柱效降低。所以今天我试着改条件，用乙腈：水=70：30，不加三乙胺，其他条件一模一样，可是发现都在9.35min出峰，两个物质分不开了。
请高手支支招！！我现在可以怎样做，才能将他们分离开啊？
谢谢谢谢！！！！
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踏踏实实地走好自己的路
1楼 2012-09-10 21:44:53
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704361326

金虫 (正式写手)

恩恩
物质二有氨基，呈弱碱性。
物之一和物质二是结构类似的物质
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踏踏实实地走好自己的路
2楼2012-09-10 22:02:59
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kimsohie

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢参与。 2012-09-11 09:27:24
能不能试试离子对？ 或者直接换一根耐碱的色谱柱好了
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---------------------------------------------------------------------------------------------------我什么都不懂！
3楼2012-09-11 08:41:25
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musell

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-09-12 13:25:29
以前做的能分开 PH值变来以后对这2类物质当然会有保留时间漂移的问题。
1.重新调整合适PH值让它们separate
2.检查你的PH校正仪是不是准确的。按理论上来说，你同样的操作和配置是不应该出现类似的问题，要么上次你没配准，要么这次有问题。
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4楼2012-09-11 10:38:13
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704361326

金虫 (正式写手)

恩恩
引用回帖:
3楼: Originally posted by kimsohie at 2012-09-11 08:41:25
能不能试试离子对？ 或者直接换一根耐碱的色谱柱好了

耐碱的色谱柱是挺好的，可是我们实验室没有。所以这条路是行不通了。
你说的离子对色谱，我正在查。谢谢你！
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踏踏实实地走好自己的路
5楼2012-09-11 11:25:23
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浩渺苍穹

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-09-12 13:25:35
首先，三乙胺跟分不分开是没有关系的；其次，估计你的色谱柱怕是要报废了。一般的C18的ODS也就2-8吧。
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一直走下去
6楼2012-09-11 14:14:27
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超级杂草

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-09-12 13:25:40
大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2 ～7.5，硅胶柱pH8时会发生硅胶溶脱 ， 键合型柱 p H<2时会发生键合相断裂，流动相尽量不超过色谱柱的p H范围。估计柱子已经报废了！
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独上高楼，望尽天涯路
7楼2012-09-11 14:45:03
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gwmgyp

版主 (知名作家)

搬砖将

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
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xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-09-12 13:25:48
两个解决方案：一、用离子对缓冲盐试试，二、购买耐高PH值的色谱柱，推荐WATERS有一种耐碱的色谱柱，用起来不错，不防一试。
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gwmgyp
8楼2012-09-12 12:59:41
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kkbyb

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-09-12 13:25:54
waters的色谱柱不错，宽pH，1-12没问题，可以考虑酸性流动相，三氟乙酸试试，不过会损失保留
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9楼2012-09-12 13:18:33
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刘荣磊2010

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一、用离子对缓冲盐试试，二、购买耐高PH值的色谱柱
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努力
10楼2012-09-12 21:47:07
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