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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 流动相为啥要用磷酸盐缓冲液？
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zhangsl112

木虫 (正式写手)

特级潜水员

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sunllxiao: 金币+5 2012-09-10 15:20:00
使用缓冲盐的作用主要是调节流动相PH的。
第二个问题，最好是不要直接倒流动相的，应为倒的时候可能会长生气泡，如果液相有在线脱气机还好一点，要是没有在线脱气机还是将流速降为零，将已经超声过的流动相重新换上。可能有时会觉得将流速低后换流动相又要重新平衡基线有点麻烦，所以才会沿着瓶壁缓慢加流动相。
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初来乍到，请多关照
11楼2012-09-10 15:12:12
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sunllxiao

银虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by zhangsl112 at 2012-09-10 15:12:12
使用缓冲盐的作用主要是调节流动相PH的。
第二个问题，最好是不要直接倒流动相的，应为倒的时候可能会长生气泡，如果液相有在线脱气机还好一点，要是没有在线脱气机还是将流速降为零，将已经超声过的流动相重新换上 ...

谢谢您的帮助
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12楼2012-09-10 15:19:52
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njydshuai

新虫 (小有名气)
很多生物样品在缓冲溶液中比较稳定。
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努力实验
13楼2012-09-10 21:48:26
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sunllxiao

银虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by njydshuai at 2012-09-10 21:48:26
很多生物样品在缓冲溶液中比较稳定。

谢谢帮助
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14楼2012-09-11 10:24:00
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zeta1712

金虫 (小有名气)
我觉得是可以倒的。
通常配缓冲液一般是在烧杯里，经常需要用乙酸或三乙胺之类的调整pH值，然后倒入装流动相的瓶子。此时再去超声脱气不一定妥当，因为三乙胺和醋酸都是容易挥发的物质，半小时超声下来，气泡是赶了一些，pH值多半已经不是超声之前的pH值了。我的经验是，配流动相之前先解决水的除气泡问题，配好缓冲液，调整到需要的pH值，就直接倒入装流动相的瓶子开始液相的操作。至于说原先瓶子里已经有缓冲液了，眼看不够了，在HPLC运行过程中往里面倒新配的液体是否合适，这个你自己把握了，首先当然是尽量避免，万不得已，倒倒也不一定不行，行不行看实际结果。毕竟很多时候要把液相停下来是很耗时耗力的事情。
总之，自己做个取舍，如果除气泡是首要问题，那就 配缓冲液-超声-HPLC，如果缓冲液的pH值重要，那就 水的脱气-配缓冲液-HPLC。
另，熟悉以后，只要按照操作规程来，HPLC其实是比较瓷实的仪器，没那么柔弱。
仅供参考。
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Embracecomplexicity,engineerversatility,anddeliversimplicity
15楼2012-09-11 12:05:24
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sunllxiao

银虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by zeta1712 at 2012-09-11 12:05:24
我觉得是可以倒的。
通常配缓冲液一般是在烧杯里，经常需要用乙酸或三乙胺之类的调整pH值，然后倒入装流动相的瓶子。此时再去超声脱气不一定妥当，因为三乙胺和醋酸都是容易挥发的物质，半小时超声下来，气泡是赶了 ...

我们液相用的瓶子  就是色谱甲醇 乙腈的试剂小口瓶  超生的时候盖上大盖子就可以适当的避免挥发吧

还有配完缓冲盐要滤过的  虽然你之前的水滤过了  但是你所用的溶质说不定就有大于0.45μm的东西咧
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16楼2012-09-12 10:34:55
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smart_phenol

银虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by dingjinglvde at 2012-09-10 14:36:54
缓冲液主要是控制流动相pH值，改善分离效果和峰形；
采用什么缓冲体系需要看药物pKa和流动相pH值范围

缓冲盐控制pH值，改善分离效果和峰形可以理解，但是缓冲盐的pH要看药物的pKa，这个怎么看，能不能举个例子。这个问题疑惑很久了，求大神解惑。
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come on with wonderful life.
17楼2014-09-12 09:06:25
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