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sunllxiao

银虫 (小有名气)

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[求助] 流动相为啥要用磷酸盐缓冲液？

为什么也想测定血药的时候要用磷酸盐缓冲液？
原理是啥？直接用磷酸不行吗？

还有流动相滤过超生去气泡之后，是否可以倾倒（在液相上的甲醇没了，我是否可以用超生过的甲醇倒入）？那在倒入的过程中会不会再产生气泡？

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1楼 2012-09-08 12:58:51

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zeta1712

金虫 (小有名气)

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专业: 药物代谢与药物动力学

我觉得是可以倒的。
通常配缓冲液一般是在烧杯里，经常需要用乙酸或三乙胺之类的调整pH值，然后倒入装流动相的瓶子。此时再去超声脱气不一定妥当，因为三乙胺和醋酸都是容易挥发的物质，半小时超声下来，气泡是赶了一些，pH值多半已经不是超声之前的pH值了。我的经验是，配流动相之前先解决水的除气泡问题，配好缓冲液，调整到需要的pH值，就直接倒入装流动相的瓶子开始液相的操作。至于说原先瓶子里已经有缓冲液了，眼看不够了，在HPLC运行过程中往里面倒新配的液体是否合适，这个你自己把握了，首先当然是尽量避免，万不得已，倒倒也不一定不行，行不行看实际结果。毕竟很多时候要把液相停下来是很耗时耗力的事情。
总之，自己做个取舍，如果除气泡是首要问题，那就配缓冲液-超声-HPLC，如果缓冲液的pH值重要，那就水的脱气-配缓冲液-HPLC。
另，熟悉以后，只要按照操作规程来，HPLC其实是比较瓷实的仪器，没那么柔弱。
仅供参考。