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zlfok00

新虫 (小有名气)


[交流] lcms建立标准曲线时,浓度级变了,如何保证分离效果?

利用lcms进行多成分分析定量,我个人的实验路线是这样的:先摸索色谱条件,然后确定洗脱梯度,之后摸索质谱条件。等条件都选定后,我想进行几个梯度浓度试验(在前期计划里设定的浓度梯度从5ng-2000ng,我在里边选了6个浓度进样:5、20、100、500、2000ng/ml),进样标准品看一下定量效果,结果问题出现了!因为lc条件摸索时是采用的较高浓度,较低进样量,得到了较好分离,然而在进行梯度浓度进样时,低浓度检测不到,高浓度无法分离,峰叠加严重,保留时间改变,EIC结果出现双峰… 于是加大进样体积,问题任然没有得到解决…
本人新手,刚接触这方面,不知道其他前辈是如何让解决这一问题的,还望不吝赐教!谢谢呢!
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zlfok00

新虫 (小有名气)


引用回帖:
5楼: Originally posted by zhangxuan200 at 2012-09-07 13:42:45
质谱不要求分离度啊,只要质荷比能分开就行。
你的重点是灵敏度,只要达到灵敏度问题不大,需要优化源参数和电压参数,具体自己摸索吧。注意上限浓度太大可能还会饱和,适当减少进样量。

谢谢指教!
还是不太清楚,参数已经逐个优化了,主要是每种检测物质EIC都有两个峰,一分半钟一个,另一个与条件摸索的保留时间相近。
上限浓度饱和是怎么回事呀?谢谢~~
6楼2012-09-08 13:56:42
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zhangxuan200

铁杆木虫 (正式写手)


★ ★
zlfok00(金币+1): 谢谢参与
leecius: 金币+1, 谢谢,欢迎常来。 2012-09-10 08:54:56
质谱不要求分离度啊,只要质荷比能分开就行。
你的重点是灵敏度,只要达到灵敏度问题不大,需要优化源参数和电压参数,具体自己摸索吧。注意上限浓度太大可能还会饱和,适当减少进样量。
5楼2012-09-07 13:42:45
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zp20100601

新虫 (小有名气)



zlfok00(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
5楼: Originally posted by zhangxuan200 at 2012-09-07 13:42:45
质谱不要求分离度啊,只要质荷比能分开就行。
你的重点是灵敏度,只要达到灵敏度问题不大,需要优化源参数和电压参数,具体自己摸索吧。注意上限浓度太大可能还会饱和,适当减少进样量。

上限浓度太大可能会饱和? 这个是什么意思啊,我马上也要做lcms了 想学习下,谢谢啦
9楼2012-09-09 18:57:34
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zlfok00

新虫 (小有名气)


QQQ倍别人霸占了,昨晚用trap试了下,EIC效果还是不佳啊,不知道为什么,每个组分都有两个峰,之后打了个二级,两个峰都是目标组分,为什么呢?是我的柱子有问题了吗?即使不要求分开这样MSMS也无法定量吧?前辈们~ 求解啊~ 小弟实在无能啊~
10楼2012-09-10 20:37:52
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smoon05063楼
2012-09-07 12:20   回复  
zlfok00(金币+1): 谢谢参与
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