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lcms建立标准曲线时,浓度级变了,如何保证分离效果?
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利用lcms进行多成分分析定量,我个人的实验路线是这样的:先摸索色谱条件,然后确定洗脱梯度,之后摸索质谱条件。等条件都选定后,我想进行几个梯度浓度试验(在前期计划里设定的浓度梯度从5ng-2000ng,我在里边选了6个浓度进样:5、20、100、500、2000ng/ml),进样标准品看一下定量效果,结果问题出现了!因为lc条件摸索时是采用的较高浓度,较低进样量,得到了较好分离,然而在进行梯度浓度进样时,低浓度检测不到,高浓度无法分离,峰叠加严重,保留时间改变,EIC结果出现双峰… 于是加大进样体积,问题任然没有得到解决… 本人新手,刚接触这方面,不知道其他前辈是如何让解决这一问题的,还望不吝赐教!谢谢呢! |
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