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lcms建立标准曲线时,浓度级变了,如何保证分离效果?
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zlfok00
新虫
(小有名气)
应助: 5
(幼儿园)
金币: 323
帖子: 159
在线: 129.5小时
虫号: 1173846
[交流]
lcms建立标准曲线时,浓度级变了,如何保证分离效果?
利用lcms进行多成分分析定量,我个人的实验路线是这样的:先摸索色谱条件,然后确定洗脱梯度,之后摸索质谱条件。等条件都选定后,我想进行几个梯度浓度试验(在前期计划里设定的浓度梯度从5ng-2000ng,我在里边选了6个浓度进样:5、20、100、500、2000ng/ml),进样标准品看一下定量效果,结果问题出现了!因为lc条件摸索时是采用的较高浓度,较低进样量,得到了较好分离,然而在进行梯度浓度进样时,低浓度检测不到,高浓度无法分离,峰叠加严重,保留时间改变,EIC结果出现双峰… 于是加大进样体积,问题任然没有得到解决…
本人新手,刚接触这方面,不知道其他前辈是如何让解决这一问题的,还望不吝赐教!谢谢呢!
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2012-09-07 11:44:57
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zhangxuan200
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zlfok00(金币+1): 谢谢参与
leecius: 金币+1, 谢谢,欢迎常来。
2012-09-10 08:54:56
质谱不要求分离度啊,只要质荷比能分开就行。
你的重点是灵敏度,只要达到灵敏度问题不大,需要优化源参数和电压参数,具体自己摸索吧。注意上限浓度太大可能还会饱和,适当减少进样量。
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5楼
2012-09-07 13:42:45
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