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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR问题
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lifefly

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-09-07 13:31:39
你的基因组是提了多久了？如果时间长了的话可能是会有问题的，至于你的引物首先要确保没有拿错，还有你加入的时候的量要注意，有些微量操作时你要确保你的引物有没有加好，一般我们做PCR都是用PCRmix的，如果你也是这样，这一块我觉得应该没问题，然后你PCR设置程序时如果直接用的前人的程序时，你要看看注意退火温度，延伸时间，或许别人有可能改动过。
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11楼2012-09-07 10:20:12
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xiaodongjia

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
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小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-09-07 13:31:52
P不出来这种情况很常见的，我之前也遇到过这种情况，后来发现是引物的问题。建议你先从引物着手，看引物是否适合，另外做梯度PCR，摸索最佳条件，如果还是做不出来就更换试剂，检查模板DNA或cDNA提取的对不对，总之，PCR里所有用到的东西都检查一遍。
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12楼2012-09-07 11:39:48
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ljsrzc

木虫 (正式写手)

喜欢海贼王喜欢娜美喜欢汉库克

【答案】应助回帖

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摸索一下其它条件，我最近也在做，一天能做出来，另一天就做不出来，愁着呢
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在一家试剂公司，买科研产品找我哦q2229097569
13楼2012-09-07 16:33:05
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