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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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叶落雨枯

新虫 (正式写手)

[交流] 柱层析损失样品太多，怎么办

我每次上柱层析，感觉下来的量都很少，一个上了35g样，只下来了10g；一个上了15g样品，之下来6g；一个上了6g样品，下来了有两三克吧，感觉这个还算多的；现在上了个小柱，1g样品，估计只下来了几十毫克。为什么会损失这么多样品啊，怎样能减少损失？？？
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1楼 2012-09-05 21:57:27
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西安事变

木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
叶落雨枯: 金币+2 2012-09-08 10:09:00
引用回帖:
18楼: Originally posted by 叶落雨枯 at 2012-09-07 12:17:53
非常感谢您的回帖！再请教一个问题，无论是划段还是收集，是要把前一个比例的都洗完了再换下一个比例，还是只需要收集一定的体积就可以？...

我的经验吧，首先根据TLC来判断，用哪个比例的溶剂洗脱哪几个成分。柱层析的时候，对接收的流分再用TLC检测，如果目标成分已经比较少了，就该及时增加极性，进入下一个段了，不要指望能切得干净利索一点交叉都没有，那要求很高的经验值，只有做的足够多了才能达到这种境界。当你一心等着前一个极性段的成分完全流出时，往往事与愿违，相邻的极性段已经下来了。至于收集一定的体积，这同样要根据样品的量、柱子的规模以及洗脱的进展情况来调整，不能太死板。
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22楼2012-09-07 22:16:11
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dmm1111

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
leecius: 金币+1, 谢谢参与。 2012-09-06 09:18:23
硅胶吸附严重，可以湿法上样，或者用葡聚糖柱子可以减少损失
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2楼2012-09-05 23:03:34
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wangfei.ac

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
leecius: 金币+1, 谢谢参与。 2012-09-06 09:18:28
不宜洗脱过长的时间，时间越长，死吸附越严重；极性中等或中等偏大的，还是采用反相材料为好，损失小。
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3楼2012-09-06 08:41:27
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叶落雨枯

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dmm1111 at 2012-09-05 23:03:34
硅胶吸附严重，可以湿法上样，或者用葡聚糖柱子可以减少损失

谢谢！我一直都是采用的拌样的方法， 干法湿法对样品没有什么要求吗，是不是只要溶解性好的都可以采用湿法上样
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4楼2012-09-06 08:58:32
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