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berthelot比色法测定发酵液中的γ-氨基丁酸，发酵液遇苯酚变浑浊 已有1人参与
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如题，测定标样时没有问题，但是发酵液遇苯酚后变浑浊后面结果无法测定，怎么解决呢？ 应该是发酵液中的蛋白质等大分子变性，试过TCA除蛋白，先加苯酚沉淀离心，但是结果还是浑浊 |
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pipibaby
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【答案】应助回帖
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m606: 金币+5, ★有帮助, 谢谢！ 2012-09-06 08:44:31
zhang8826857: MicEPI+1, good，lz反馈有帮助，而且回答的很用心，epi一枚 2012-09-08 10:04:14
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zhang8826857: MicEPI+1, good，lz反馈有帮助，而且回答的很用心，epi一枚 2012-09-08 10:04:14
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1. 可以把苯酚的用量和时间 再 重新确定一下 2. 可以把发酵液用真空过滤网过滤过，相当于再次提纯一下，除掉一些小分子的杂质 3. 去除蛋白后 也可以考虑过滤一下，小分子的就不要用了 4. 不知道你的实验具体是如何操作的，但是，如果涉及到温度的话，最好控制一下， 或者参考一下相关文献，改变你的温度，以免蛋白变性 5. 还有就是把你用到的最初最初的原料很仔细的提纯后再进行下面一步的实验，实验过程中的每个试验参数都要很仔细的去考量， 6. 离心的速度和时间要控制一下 7. 实验过程中，要确保操作空间的无菌 只能想到这么多，希望对你能有帮助 |
2楼2012-09-06 00:35:41
3楼2012-09-06 08:49:30
pipibaby
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【答案】应助回帖
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我没做过类似的实验，但是我做过很多的别的方面的类似的实验，所以，出现问题的时候，我会想到从这些方面着手去考虑，先解决几个问题再说 做实验时很费时间的，有的时候做了一两个月，出来的结果还不尽如意 另外，可以建议你，你做实验的时候，试验周期如果比较长的话，你可以考虑平行做几组实验，这样，其中一组如果不小心污染了，还有备份的 不知道你具体做的是什么，我以前做细胞培养和药物缓释的时候 是平行几组做的，因为细胞的培养周期比较长，这样，即使 期间有的被污染了，我还有备份，不用重头来过 还有就是 你用的苯酚是生物实验级用的吗？这个最好不要用工业级，用纯度高的实验级的 祝好运 |
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m6064楼2012-09-07 00:29:48
5楼2012-09-07 12:21:52
金多学儿
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楼主你好！最近我也在做r-氨基丁酸的检测，查了一些文献，我选择的鼻塞法，可是在做标曲的时候不显色 ，想请教楼主，你做标曲的具体步骤是怎样的？ berthelot比色法测定发酵液中的γ-氨基丁酸，我看的文献也有不一样的地方，希望把你做的给我分享一下！谢谢！ 最近一直做这个，参考文献按上面的方法就是做不出来，不知道哪里出问题了，郁闷！都担心毕业都成问题了！ 再次感谢楼主分享你的做标曲的方法和具体步骤！也可以发我的邮箱！bijingli2008@163.com 我们也可以关于这个实验的其他进行交流！ |
6楼2013-09-06 10:42:24
7楼2013-09-06 11:03:26
rr24chx
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