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dxli1988

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
在Amp板上生长时间做好不超过16小时,时间越长也越容易失效。
逆水行舟,不进则退。
11楼2012-09-06 23:42:13
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zmj521good

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 米兰红黑魂 at 2012-09-04 22:23:56
试问楼主培养皿上的菌是成单个菌落的吗?如果全部长满,几乎平铺了涂布到的地方,说明是amp失效啦!如果是单个菌落的话,那原因还需要另外找了。

有单个菌落,不过还是很多大片大片的菌,几乎铺到所有的地方,但是在此一周前,刚做过一批,有目的克隆菌,Amp应该没问题吧,还有我配制的Amp有味道,像羧苄青霉素的味道一样,猜想应该没有问题吧。
认真是一种习惯
12楼2012-09-07 21:01:59
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zmj521good

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by hutingting at 2012-09-06 11:51:56
Amp和感受态失效否?这两个通过做对照没问题的话,那很可能就是载体 自连

Amp和感受态是否失效还未鉴定,但应该不是载体自连,因为我做菌液PCR时是用的载体上的通用引物,而我扩增,结果和不加菌液一样。
认真是一种习惯
13楼2012-09-07 21:04:32
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zmj521good

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by dxli1988 at 2012-09-06 23:42:13
在Amp板上生长时间做好不超过16小时,时间越长也越容易失效。

哦,不过我一般培养不超过12个小时,菌都长的哗啦啦的
认真是一种习惯
14楼2012-09-07 21:05:53
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zmj521good

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by irenescbg at 2012-09-05 09:22:38
通常有两种可能,一种是Amp失效,如上所说,另外一种也比较常见,就是感受态细胞污染。我们实验室最近就是这样的,明明挑单克隆做感受态,谁知道居然就有Amp抗性菌的污染,直接把没转化的感受态细胞涂在Amp板子上一 ...

我的Amp是否失效我还没有检测,不过感受态细胞应该不会污染吧,因为我是直接从TAKARA买的50 微升每管的感受态,当然,他们也可能有污染了的感受态,不过概率应该较小吧
认真是一种习惯
15楼2012-09-07 21:08:17
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易水寒明

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你确定连接好了?空载体转化也有抗性的哦
16楼2013-07-11 08:37:09
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zmj521good

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
16楼: Originally posted by 易水寒明 at 2013-07-11 08:37:09
你确定连接好了?空载体转化也有抗性的哦

已经解决了,是Amp有问题
认真是一种习惯
17楼2013-07-11 11:31:31
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