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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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代号47

新虫 (初入文坛)


[交流] 酶连问题

双酶切后,酶连遇到一些问题:在连接过程中,按照一定规则进行加样,10ul体系反应,每次都连不起来,我一开始是12小时过夜,后来是16个小时过夜,都没有成功,我怀疑是片段自连,请问在两个片段都加进pcr管中后怎样让其不发生自连,然后再加酶反应,是58° 10min中,然后放冰上,还是?
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dshlove

木虫 (正式写手)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-09-05 13:50:03
用Promega的fastAP处理后回收,基本就很少自连接了。
两个片段加上T4连接酶,16℃,30分钟足够了。
2楼2012-09-04 15:47:02
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