20楼: Originally posted by chjinzhi at 2012-08-28 10:54:05
你要是知道退火温度就不用啦！我是试了很多温度，后来就试烦了，干脆touchdwn了。...

14楼: Originally posted by dxli1988 at 2012-08-27 15:46:48
是前辈啊，呵呵，“我常用的是在第一轮在一较高的温度退火后，72度延伸10min。”这句话是什么意思呢？做了很久，也有不少人给建议，就是没做出来，...

18楼: Originally posted by muscle920 at 2012-08-28 01:09:55
muscle920
很正确，第一步胶回收，可以一比一的进行提供第二步的模板，延伸时间由长片段决定，注意第二步除了引物外其余的都加，可以循环10个cycle，后延伸10 min，不用电泳，直接取10 ul用作第三步PCR的模板，第 ...