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betty

金虫 (正式写手)

[交流] 微生物菌种的复壮

用甘油管保存的菌由于时间较长，且已经传代多次了，需要从甘油管里选出酶活较高的菌。经过平板涂布、划线分离挑出单菌落、种子和发酵培养基后竟然测不出酶活了，这过程中会出现什么问题呢？（甘油管的菌都是有酶活的）

这个实验已经跟同学重复几遍了，都没有结果。且平板上长出的单菌落形态基本相似，也从划线平板上挑出多株单菌落做多组实验，依然没有结果。


请各位高手指教这过程中有什么问题，如果有什么好的复壮方法也望不吝赐教！

[ Last edited by betty on 2012-8-24 at 18:49 ]
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1楼2012-08-24 18:47:36
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liurechen

银虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-26 08:32:25
betty: 金币+2, 你的回帖很详尽，谢谢！ 2012-08-26 10:10:24
引用回帖:
6楼: Originally posted by liurechen at 2012-08-25 09:24:21
我们一般这样做：甘油管划线分离并对单菌落做标记，单菌落分别接种发酵培养基，分别测酶活，挑出酶活最好的单菌落，放大。

在做发酵的厂家，菌种复壮工作是一种日常工作。
甘油管一般划线后长出的单菌落做标记单独做发酵测试测酶活和转化水平，平板暂时不能丢弃，然后把在发酵小试上表现好的单菌落再做放大，放大后在与生产上的菌种作对比，如果转化水平高于生产水平，则做进一步稳定性考察后作为生产菌种使用。
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7楼2012-08-25 22:37:01
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841790061

银虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
betty: 金币+1, 是不是菌株在活化时没长好？ 2012-08-25 12:30:03
我从菌中保藏中心买来的菌种复水后，在平板上都过了三四天一点现象也没有，不知道咋整的？

另外，针对你的问题，我不太懂。
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2楼2012-08-24 21:57:03
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
betty: 金币+1, 我们的菌一直都是经过种子、发酵两个阶段的，两种培养基的基本成分类似 2012-08-25 12:31:44
必须经历种子阶段吗？我的菌如果搞种子，再接种酶活力就很低了。
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3楼2012-08-25 00:04:01
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tapmun

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
betty: 金币+1 2012-08-25 12:35:38
我从菌种保藏中心买回来的菌，发酵之后也没活下来，不知道为何
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4楼2012-08-25 00:42:19
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