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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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qianhaobei

铜虫 (初入文坛)

[求助] 提取质粒

关于质粒的提取:我小提用的是天根小题中量质粒试剂盒,大提用的是无内毒素质粒大提试剂盒,提的是大肠杆菌,已经三个星期了,还没成功!小提后PCR,质粒在对照片段的条带有点虚,大提后PCR,琼脂糖凝胶电泳分析,在对照片段下面和上面有条带,应该是引物二聚体和模板吧,同样的条件下,原来的质粒条带清晰明亮,可我提的质粒PCR就是扩不出来,但测定浓度是498ng/μl。我的质粒大小是15150bp,扩增片段是438bp。请虫友们指点……感激不尽!
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加油……
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zy晨曦

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

电泳图片中的三条带怎样才算质粒提取的很好呢
日事日毕,日清日高
4楼2012-11-03 08:50:27
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查看全部 7 个回答

starseacow

专家顾问 (职业作家)

楼主最好把电泳图谱贴一张上来,大家好帮你分析
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2012-08-24 18:55:50
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wangtaodluf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我怀疑是你PCR的问题,质粒提取是最简单的实验,出问题的可能性很小。说说你PCR的体系和条件。
3楼2012-08-24 19:51:21
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qianhaobei

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wangtaodluf at 2012-08-24 19:51:21
我怀疑是你PCR的问题,质粒提取是最简单的实验,出问题的可能性很小。说说你PCR的体系和条件。

非常感谢您的关注,是转染质粒的浓度有问题,导致转染失败, 后来讲质粒稀释以后重新转染就好了。
加油……
5楼2012-11-05 14:24:30
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