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独身行天下

金虫 (小有名气)

[求助] 酵母生长缓慢

酵母菌液稀释十倍后涂布平板(使用YPD培养基),在28°C下生长培养了四五天。。还不见菌落~~~~这是怎么回事啊。。

[ Last edited by 独身行天下 on 2012-8-24 at 11:46 ]
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
rainwander: 金币+2, 鼓励交流 2012-08-26 08:33:26
独身行天下: 金币+2, 有帮助 2012-09-26 18:44:09
引用回帖:
11楼: Originally posted by 独身行天下 at 2012-08-25 19:30:30
和我想的到一起了。我移了一点在液体YPD中摇一晚上还真的能长。不过长得效果也很不明显,底部沉淀很少。我想可能要摇2、3天。有法子让他们快点生长么~?...

这样一种情况?你接种的菌液是保存的甘油管还是培养过的菌液呢?如果培养1天后不明显应该是甘油管吧,那可以不用稀释涂布平板的,直接接种环划线,先复壮菌株,然后接菌落到液体YPD培养,这样一般1天可以达到对数期。如果你直接接种甘油管到液体YPD是会长得慢一些,如果甘油管保存时间过久,摇3-4天都是可能的,但这样不好一般先经过平板的复壮。
如果你接种的是菌液,在平板上生长过于缓慢,但能在液体YPD中生长,我认为还是受密封的影响。

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13楼2012-08-25 19:43:01
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, MicEPI+1, good,分析的很有道理,并结合自己的实验经验给出了解答。 2012-08-24 15:05:27
独身行天下: 金币+4, ★★★很有帮助 2012-09-26 18:42:31
平板有抗性吗?没有抗性的话那就是你稀释的有问题了,可能是稀释用的水的酸碱值,也可能是平板太干燥了,4-5天太久了(可以再温箱中放一盘水,可有效缓解干燥问题),当然这都是在你确定你的是酵母了。
总的来说,就是你的培养环境不对,菌都死了,酵母不可能只是单纯的菌液稀释涂布培养4-5天都不长。一般1天半就应该有明显菌落出现。

当然还有另外一种可能性,那就是你的菌浓度太高,而你稀释10倍,倍数太少了。那么在你的平板上很有可能张的是非常细密的一层,只是你以为没有而已。一般酵母培养1天左右就基本进入到对数生长期了,这时菌量是非常多的。我做稀释涂平板一般稀释100000--100000000倍。

不过如果你的菌液在4度保存时间过久(超过一周),你在稀释10倍,不长也算奇怪。如果在-20保存了,那肯定是不长的。

个人意见,仅供参考。

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2楼2012-08-24 14:16:11
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616057157

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
酵母菌落乳白色,生长的话不可能看不见,故应排除菌浓太高

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不曾拥有何谈失去,不必伤心!!!
3楼2012-08-24 21:43:49
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独身行天下

金虫 (小有名气)


送鲜花一朵
zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-25 21:10:47
引用回帖:
2楼: Originally posted by reallpf at 2012-08-24 14:16:11
平板有抗性吗?没有抗性的话那就是你稀释的有问题了,可能是稀释用的水的酸碱值,也可能是平板太干燥了,4-5天太久了(可以再温箱中放一盘水,可有效缓解干燥问题),当然这都是在你确定你的是酵母了。
总的来说, ...

首先肯定的是我的菌株绝对是酵母。
稀释用的水是灭菌的蒸馏水,PH大致6.8。
我把平板放在暗处培养的,不知道光线是否影响酵母的生长。
涂布菌液的时候,我把平板上的菌液涂干了,难道培养基不能提供水分让酵母生长么?
每个平板都是加膜密封好的,不会是酵母缺氧死了吧~
4、5天了,平板还是透明清晰,不像菌浓度太高而导致平板上很有可能长的是非常细密的一层
酵母是常见的菌种,应该很好生长的才对,到我手里就不长了。难道是人品啊~~
4楼2012-08-25 11:17:44
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