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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 内参引物
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qiuzhileipo

木虫 (正式写手)

生如夏花

[求助] 内参引物

我近来想做共生菌的荧光定量PCR，绝对定量花费太高，想做相对定量，但是看到有一篇文献说原核生物由于缺乏看家基因，因此不能做相对定量，不知道是不是这样？但是有的文献说可以用16sRNA作为内参，很迷茫，那位大虾指点一下，不胜感激呀！
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1楼 2012-08-22 14:31:50
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qiuzhileipo

木虫 (正式写手)

生如夏花
引用回帖:
4楼: Originally posted by gywyl1977 at 2012-08-24 12:26:26
16sRNA是可以的。但原核生物中它的丰度一般比较高，所以做的时候可以选择一些丰度低的看家基因作为内参，比如pullulanase基因等。

由衷的感谢您！我再查查资料看看共生菌里面pullulanase gene的表达情况。
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5楼2012-08-24 17:18:20
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eagles123

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-23 18:06:56
可以用16sRNA做内参做相对定量。我也看过一些甚至nature的文章用16sRNA做内参的。
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2楼2012-08-22 19:47:21
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qiuzhileipo

木虫 (正式写手)

生如夏花
引用回帖:
2楼: Originally posted by eagles123 at 2012-08-22 19:47:21
可以用16sRNA做内参做相对定量。我也看过一些甚至nature的文章用16sRNA做内参的。

谢谢啦！如果有或者看到这样的文章，麻烦给我发一篇！我的邮箱是zhangyuanchen0110@163.com不胜感激！
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3楼2012-08-24 11:32:23
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gywyl1977

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
16sRNA是可以的。但原核生物中它的丰度一般比较高，所以做的时候可以选择一些丰度低的看家基因作为内参，比如pullulanase基因等。
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4楼2012-08-24 12:26:26
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