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qiuzhileipo

木虫 (正式写手)

生如夏花

[求助] 内参引物

我近来想做共生菌的荧光定量PCR,绝对定量花费太高,想做相对定量,但是看到有一篇文献说原核生物由于缺乏看家基因,因此不能做相对定量,不知道是不是这样?但是有的文献说可以用16sRNA作为内参,很迷茫,那位大虾指点一下,不胜感激呀!
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gywyl1977

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
16sRNA是可以的。但原核生物中它的丰度一般比较高,所以做的时候可以选择一些丰度低的看家基因作为内参,比如pullulanase基因等。
4楼2012-08-24 12:26:26
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eagles123

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-23 18:06:56
可以用16sRNA做内参做相对定量。我也看过一些甚至nature的文章用16sRNA做内参的。
2楼2012-08-22 19:47:21
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qiuzhileipo

木虫 (正式写手)

生如夏花

引用回帖:
2楼: Originally posted by eagles123 at 2012-08-22 19:47:21
可以用16sRNA做内参做相对定量。我也看过一些甚至nature的文章用16sRNA做内参的。

谢谢啦!如果有或者看到这样的文章,麻烦给我发一篇!我的邮箱是zhangyuanchen0110@163.com不胜感激!
3楼2012-08-24 11:32:23
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qiuzhileipo

木虫 (正式写手)

生如夏花

引用回帖:
4楼: Originally posted by gywyl1977 at 2012-08-24 12:26:26
16sRNA是可以的。但原核生物中它的丰度一般比较高,所以做的时候可以选择一些丰度低的看家基因作为内参,比如pullulanase基因等。

由衷的感谢您!我再查查资料看看共生菌里面pullulanase gene的表达情况。
5楼2012-08-24 17:18:20
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