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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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hutingting

银虫 (正式写手)

浓度一般是200ng/ul,50ul洗脱,260/280一般在1.8-2.1之间,电泳有时候一条带,有时候两条带,都正常,重要的是后面要做酶切验证质粒正确与否。
21楼2012-08-24 08:44:16
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刁寒冰

银虫 (小有名气)

引用回帖:
19楼: Originally posted by hutingting at 2012-08-24 08:41:13
我们一般提的质粒的浓度在200ng/ul左右,用50ul洗脱,A260/280一般都在1.8-2.1之间,一般取1ul质粒跑胶,有时候一条带,有时候两条带,这都正常...

嗯,看来你们提的浓度还是可以的,我再重新试一下,看这次能不能浓度高点
22楼2012-08-24 09:30:39
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刁寒冰

银虫 (小有名气)

引用回帖:
20楼: Originally posted by hutingting at 2012-08-24 08:43:26
浓度一般是200ng/ul,50ul洗脱,260/280一般在1.8-2.1之间,电泳有时候一条带,有时候两条带,都正常,重要的是后面要做酶切验证质粒正确与否。...

我只是提出质粒来,要做southern,不用酶切
23楼2012-08-24 09:31:12
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huangguoqing

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
15楼: Originally posted by 刁寒冰 at 2012-08-23 10:45:45
我用的是琼脂糖电泳,用质粒直接加10Xloading buffer电泳吧?但一直都没提出来呢,所以跑胶都没结果呢,我也不确定质粒多大了...

质粒多大不确定?你提取质粒的目的是什么?下一步要做什么呢?
24楼2012-08-24 10:00:32
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刁寒冰

银虫 (小有名气)

引用回帖:
24楼: Originally posted by huangguoqing at 2012-08-24 10:00:32
质粒多大不确定?你提取质粒的目的是什么?下一步要做什么呢?...

就是看一下质粒大小,之后要做southern
25楼2012-08-24 10:05:22
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hutingting

银虫 (正式写手)

引用回帖:
23楼: Originally posted by 刁寒冰 at 2012-08-24 09:31:12
我只是提出质粒来,要做southern,不用酶切...

酶切只是验证质粒对不对
26楼2012-08-24 14:57:47
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刁寒冰

银虫 (小有名气)

引用回帖:
24楼: Originally posted by huangguoqing at 2012-08-24 10:00:32
质粒多大不确定?你提取质粒的目的是什么?下一步要做什么呢?...

提质粒,做southern杂交,那个要求浓度和质量
27楼2012-08-24 16:34:49
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韩春歌

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我的建议是第一,你要确定你要提的菌可以用这个试剂盒;第二,这个菌里面确实含有质粒;第三,浓度低的话可以在一开始多培养细菌,第一步离心时富集一下菌体,比如要求30毫升的,你可以加到50毫升。第四,参考说明书时一定严格按照要求,注意每个细节。
一次结果不好就多提几次,不要嫌麻烦,我们实验室的也有开始提不好的,跟着提过的看一次也是能发现问题的。祝你实验顺利
28楼2012-11-01 08:45:13
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