24小时热门版块排行榜    

查看: 1714  |  回复: 16

lxh502976898

金虫 (小有名气)

[交流] 质粒提取 已有10人参与

为什么质粒提取的时候 加裂解液II的时候 ,没有拉丝现象 ,最后提取完nano检测浓度偏低,做电泳没有带,谢谢回帖帮助
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wt3532

木虫 (著名写手)

涛声依旧

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流 2012-08-20 14:00:45
1ml的菌液如果可以的话肯定是有质粒的,最少的做过0.5ml的都有拉丝现象。如果不拉丝我觉得可能是染菌了。因为不管大肠杆菌中有没有质粒,都会有拉丝现象。有的说拉丝是由于细胞的裂解,也有的说拉丝是由于细菌中染色体DNA造成了溶液粘稠现象。不拉丝还有一个现象是你溶液2中NaOH失效了,重新配制后用。
有些参考书上写的是如果加入sol2没有拉丝现象,质粒提取实验可以停止不做了。
希望对楼主有帮助。
10楼2012-08-20 08:42:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

xiongyaoling

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流! 2012-08-18 21:56:26
加裂解液II,溶液应该是变清吧,加裂解液3,会有白色沉淀出现,我用天根试剂盒抽的都是这样,
还有你确实你的菌有质粒吗?
2楼2012-08-18 18:21:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

烟涛微茫

铁杆木虫 (文坛精英)

卡牌大师


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼上说的是,加溶液三才有沉淀啊

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
心之所善,九死未悔
3楼2012-08-18 18:42:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxh502976898

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xiongyaoling at 2012-08-18 18:21:25
加裂解液II,溶液应该是变清吧,加裂解液3,会有白色沉淀出现,我用天根试剂盒抽的都是这样,
还有你确实你的菌有质粒吗?

我今天重做了一次 估计是没有连接成功所以没有质粒
4楼2012-08-19 09:41:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王贤卓

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
AXyGEN试剂盒比较好
5楼2012-08-19 10:19:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

resurgam

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1、加裂解液II的时候 ,没有拉丝现象可能是第一步收集菌液的时候收集的太少,一般都是收3-5ml的。收1ml浓度又低确实不会有拉丝现象。
2、连接完涂板后先挑十几个单菌落摇摇然后做菌液电泳吧,可能是阳性的再扩大摇摇提质粒进一步鉴定,节约时间哈
6楼2012-08-19 10:45:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

代号47

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我们都是手提质粒,现在的人什么都是试剂盒,我比较赞同手提!提质粒要注意动作缓慢,充分混匀。
7楼2012-08-19 15:24:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenhuize

木虫 (正式写手)

混匀了吗?
8楼2012-08-19 17:45:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bbwalkman

木虫 (小有名气)

重新做一次试试吧,看好说明书呢

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
9楼2012-08-19 21:26:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lxh502976898 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 不应该看fileCode +5 且听虎啸 2026-08-12 5/250 2026-08-12 16:19 by 云上清扬
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +7 Tide man 2026-08-11 7/350 2026-08-12 16:15 by 风逸1991
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[基金申请] 长年满屏的广告,版主太不责任了。基金也等的急 +4 gltch 2026-08-12 4/200 2026-08-12 16:08 by eulota
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +4 majunge000 2026-08-10 4/200 2026-08-12 15:46 by 云上清扬
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
信息提示
请填处理意见