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2007zhuaili

银虫 (初入文坛)

[求助] 【求助】凝胶LH-20洗脱剂怎么确定

正丁醇部位经过硅胶柱二氯甲烷:甲醇(12:1)洗脱下来的部分,想过凝胶LH-20进一步分离纯化,请问怎么确定洗脱剂?
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鸭绿江畔

铁杆木虫 (著名写手)

牛B

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-08-15 12:43:53
直接用甲醇做流动相即可。没问题的
我那么努力,就是为了在更高的层次遇见你!
2楼2012-08-14 11:50:12
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housexpf99

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-08-15 12:43:59
我还是建议你从60%甲醇-水系统开始,梯度洗脱(依次为60%-70%-80%-90%-甲醇),反相薄层监察,合并同类相,这样能分的纯些。
不喜欢搞科研,还是难逃魔掌
3楼2012-08-14 16:02:44
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火箭穿屁屁

木虫 (正式写手)

地球球长

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
2007zhuaili: 金币+1, ★有帮助 2012-08-15 09:27:33
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-08-15 12:44:04
你的东西极性较小 建议用甲醇二氯甲烷系统,洗脱,比例可以用三比一或四比一,你可以试试,另外也不用梯度洗脱,你有换极性的时间东西就冲下来了,可以用一个比例反复冲洗几次提纯
绳命是入次的井猜
4楼2012-08-14 19:33:02
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雪人_sgxz

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-08-15 12:44:10
二氯比甲醇1:1也好,2:1也好,调整一个比例让你的样品用尽量少的溶剂全部溶解,然后就用这个比例上柱洗脱。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
5楼2012-08-15 09:24:28
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2007zhuaili

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 火箭穿屁屁 at 2012-08-14 19:33:02
你的东西极性较小 建议用甲醇二氯甲烷系统,洗脱,比例可以用三比一或四比一,你可以试试,另外也不用梯度洗脱,你有换极性的时间东西就冲下来了,可以用一个比例反复冲洗几次提纯

请问您说的三比一或四比一是根据什么来确定的呢?还有您说一个比例反复冲洗几次,是说把洗脱下来的东西再次上柱再用此比例的系统冲洗吗?
6楼2012-08-15 09:27:07
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2007zhuaili

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by housexpf99 at 2012-08-14 16:02:44
我还是建议你从60%甲醇-水系统开始,梯度洗脱(依次为60%-70%-80%-90%-甲醇),反相薄层监察,合并同类相,这样能分的纯些。

我之前用50%的甲醇洗脱过,可是一下子全洗脱下来了
7楼2012-08-15 09:31:12
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2007zhuaili

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 鸭绿江畔 at 2012-08-14 11:50:12
直接用甲醇做流动相即可。没问题的

我已经用纯甲醇洗脱过,可是分下来的东西没怎么分开,不过还是有点效果的,至少可见我这个部分有五个点,而且这五个点挨得很近
8楼2012-08-15 09:33:34
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火箭穿屁屁

木虫 (正式写手)

地球球长

引用回帖:
6楼: Originally posted by 2007zhuaili at 2012-08-15 09:27:07
请问您说的三比一或四比一是根据什么来确定的呢?还有您说一个比例反复冲洗几次,是说把洗脱下来的东西再次上柱再用此比例的系统冲洗吗?...

比例也是依据你样品的极性来确定的 这个你可以自己摸索,反复冲洗的意思你理解的正确,葡聚糖样品说白了下来的很快 一般一天可以上好几次,很节省时间。总的来说就是通过反复上柱来达到相当于延长柱体积的效果啊
绳命是入次的井猜
9楼2012-08-15 09:53:13
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火箭穿屁屁

木虫 (正式写手)

地球球长

引用回帖:
8楼: Originally posted by 2007zhuaili at 2012-08-15 09:33:34
我已经用纯甲醇洗脱过,可是分下来的东西没怎么分开,不过还是有点效果的,至少可见我这个部分有五个点,而且这五个点挨得很近...

你没分开我感觉是不是柱体积不够?就是说长度不够?
我一般都是一米长的柱子,或者上到80CM以上的
一定要增加柱长度
绳命是入次的井猜
10楼2012-08-15 09:54:42
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